[发明专利]一种小叶红豆离体胚培养及植株再生方法

说明书

技术领域

本发明属于经济林的栽培方法，特别是涉及小叶红豆离体胚培养及植株再生方法。

背景技术

小叶红豆（Ormosia micropylla）为蝶形花科Papilionaceae红豆树属Ormosia G. Jacks.树种,稀有种。小叶红豆表现为衰退型，林下自然更新困难，自然繁衍能力、传播扩散能力不强，随着群落的发展与演替，将会被其他物种更替。小叶红豆木材坚硬、材质优良，其边材和心材区别明显，边材浅黄褐色，心材比例大，为深紫红色至紫黑色，民间称之为“紫檀木”，木材纹理通直，结构细匀，干缩小，耐腐性强，色泽及花纹美观，是制造高级家具、乐器、美术工艺品的特种珍贵用材，极为珍贵。分布于贵州、福建、广东、广西等地，生于海拔600-800m的山坡中。由于长期过度采伐，小叶红豆目前数量存量稀少，为濒临灭绝物种，有关小叶红豆种群及群落结构研究的资料较少，因而实施有效保护迫在眉睫。小叶红豆材树形高大干直优美，是良好的风景观赏树种。现有技术中小叶红豆自然资源少，成活率低，扁椭圆形种皮坚硬 、蜡质、发芽不齐，有的种子在土壤中2 年后才发芽，种子易遭鼠、鸟食;种子坚硬，种皮透水性差，种皮不易吸水萌发，必须经特殊催芽处理才能萌发，自然更新困难，自然繁衍能力、传播扩散能力不强，因此开展优良单株的研究并采取组织培养无性繁殖技术，对培育优质苗和高效保育珍稀濒危珍贵乡土树种小叶红豆资源，调整林种树种结构，促进林业可持续发展，为小叶红豆遗传改良、种苗繁殖技术、人工栽培技术、大树迁地移植以及对珍贵树种实施有效的保护与管理等研究工作提供技术支持，具有重要的理论意义和高经济价值的开发利用前景。

发明内容

本发明提供一种小叶红豆离体胚培养及植株再生方法，该培养方法扩繁系数较高，萌发时间短，增殖速度快，经壮苗培养，成苗移植后的成活率高，苗木健壮挺拔，长势良好，对高效保育珍稀濒危小叶红豆资源具有重要的理论意义和较高经济价值及开发利用前景。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

包括以下步骤：

1）取材方法：选取当年结实、籽粒饱满的豆荚为材料，采摘后置3-5℃冰箱冷藏保存备用；

2）培养基的配制：分别配制胚芽诱导培养基、初代芽诱导培养基、芽增殖培养基、壮苗培养基和生根培养基，这些培养基的PH值为5.7-5.9，培养基厚度为1.4～1.6 cm； 所述胚芽诱导培养基：1/2MS+0.5-2.0mg·L^-1BA+0.1-1.0mg·L^-1IAA+0.1-0.3mg·L^-1NAA+5.0-7.0g·L^-1Ag⁺+18-22g·L^-1Su+1.0-1.5 g·L^-1Ac，

所述初代芽诱导培养基：WPM +1.0-2.0mg·L^-1BA+0.4-0.6mg·L^-1KT+0.4-0.6mg·L^-1IAA+0.4-0.6mg·L^-1NAA+5.0-7.0g·L^-1Ag⁺+18-22g·L^-1Su +1.0-1.5 g·L^-1Ac，

所述芽增殖培养基：WPM+1.0-2.0mg·L^-1BA+0.5-1.5mg·L^-1KT+0.1-0.5mg·L^-1TDZ+0.4-0.6mg·L^-1NAA+ 5.0-7.0g·L^-1Ag⁺  +18-22g·L^-1Su +1.0-1.5 g·L^-1Ac，

所述壮苗培养基：WPM+0.5-1.0mg·L^-1BA+0.1-0.5mg·L^-1KT+0.1-0.5mg·L^-1NAA+0.5-1.0mg·L^-1IAA+5.0-7.0g·L^-1Ag⁺ +18-22g·L^-1Su +1.0-1.5 g·L^-1Ac，