[发明专利]感受胞内pH变化的Smad5蛋白及其应用有效

专利信息
申请号: 201310655201.0 申请日: 2013-12-05
公开(公告)号: CN104693308B 公开(公告)日: 2020-08-04
发明(设计)人: 章小清;刘玲;房玉江 申请(专利权)人: 同济大学
主分类号: C07K19/00 分类号: C07K19/00;C12N15/62;C12N15/867;C12N5/10;C12P21/02;C12Q1/02
代理公司: 上海一平知识产权代理有限公司 31266 代理人: 祝莲君;雷芳
地址: 200092 *** 国省代码: 上海;31
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摘要:
搜索关键词: 感受 ph 变化 smad5 蛋白 及其 应用
【权利要求书】:

1.一种Smad5蛋白或其编码序列的用途,其特征在于,用于构建具有核浆穿梭功能的重组蛋白,其中所述的核浆穿梭包括出核和入核;

并且,所述的重组蛋白具有选自下组的一种或多种功能:

(a)所述重组蛋白的核浆穿梭受温度调控,其中包括:可感受低温,并在低温下导致促进重组蛋白的出核;感受高温,并在高温下导致促进重组蛋白的入核;

其中,所述低温是指低于32.5℃的温度,所述高温是指高于37℃的温度;

(b)所述重组蛋白的核浆穿梭受胞外pH调控,其中包括:可感受胞外pH升高情况,当pH高于7.48时,导致促进重组蛋白的出核;感受胞外pH降低情况,当pH低于6.62时,导致促进重组蛋白的入核;

(c)所述重组蛋白的核浆穿梭受胞内pH调控,其中包括:可感受胞内pH升高情况,当pH高于7.48时,导致促进重组蛋白的出核;感受胞内pH降低情况,当pH低于6.62时,导致促进重组蛋白的入核;

(d)所述重组蛋白的核浆穿梭受胞外渗透压的调控,其中包括:可感受胞外渗透压升高情况,当渗透压高于350mOSM/kg时,导致促进重组蛋白的出核;感受胞外渗透压降低情况,当渗透压低于250mOSM/kg时,导致促进重组蛋白的入核。

2.一种Smad5的MH1结构域或其编码序列的用途,其特征在于,用于构建感受温度变化、胞外pH变化、胞内pH变化以及胞外渗透压变化的重组蛋白。

3.如权利要求2所述的用途,其特征在于,所述的Smad5的MH1结构域的氨基酸序列如SEQ ID NO:2中第1-133位所示。

4.一种重组蛋白,其特征在于,所述的重组蛋白含有(a)外源的、温度/胞内外pH/渗透压感受元件,即核浆穿梭信号感受元件,以及(b)与所述元件(a)操作性相连的氨基酸序列,

其中,所述的温度/胞内外pH/渗透压感受元件是来源于Smad5的MH1结构域;

并且所述的重组蛋白不是Smad5蛋白。

5.如权利要求4所述的重组蛋白,其特征在于,所述的Smad5的MH1结构域的氨基酸序列如SEQ ID NO:2中第1-133位所示。

6.一种核酸序列,其特征在于,所述核酸序列编码权利要求4所述的重组蛋白。

7.一种载体,其特征在于,所述的载体含有权利要求6所述的核酸序列。

8.一种重组细胞,其特征在于,所述的重组细胞含有权利要求7所述的载体或基因组中整合有权利要求6所述的核酸序列。

9.一种产生权利要求4所述的重组蛋白的方法,其特征在于,包括步骤:

(i)培养权利要求8所述的重组细胞,从而表达权利要求4所述的重组蛋白;和

(ii)分离或纯化所述的重组蛋白。

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