[发明专利]一种从蜘蛛香药渣中获得高纯度橙皮素的方法

说明书

技术领域

本发明涉及中药有效成分提取分离方法，特别涉及一种从蜘蛛香药渣中获得高纯度橙皮素的方法。

背景技术

蜘蛛香为败酱科缬草属植物蜘蛛香（Valeriana jatamansi Jones）的干燥根茎和根。分布于为我国四川，贵州，云南，湖南，湖北，陕西等地。具有疏散风热，利咽，透疹，明目退翳，解痉之效。用于治疗风热感冒，咽痛音哑，麻疹不透，风疹瘙痒，目赤翳障，惊风抽搐，破伤风。药理研究显示：蜘蛛香可作用于中枢神经系统，有镇静、催眠、抗惊厥和抗焦虑的作用；还可以治疗病毒性腹泻、季节性腹泻和肠易激综合症；而且其中环烯醚萜类化合物还能治疗良性的前列腺增生。化学成分研究表明：蜘蛛香中主要含有挥发油、环烯醚萜类和黄酮类，其中橙皮苷的含量是缬草属植物中含量最高的植物，随产地不同含量在0.4%～1.2%之间波动。

橙皮素（Hesperitin）属于二氢黄酮类化合物，别名：3,5,7-三羟基-4-甲氧基黄酮、圣草酚4-甲基醚。分子式为C₁₆H₁₄O₆，分子量为302.27，淡黄色针状结晶，熔点226℃-228℃。橙皮素易溶于乙醇、甲醇、丙酮，溶于稀碱溶液，部分溶于乙醚，微溶于水、氯仿和苯。药理作用：抗氧化，橙皮素可通过清除过氧亚硝酸根离子，避免过氧化反应带来的危害，如癌变。抗炎，橙皮素可以抑制炎性介质的介导作用，从而间接抑制炎症反应。与橙皮苷相比，橙皮素有更强的抗炎作用。降血脂，橙皮素可以抑制胆固醇的生成酶及酯化酶的作用，从而达到降血脂的作用。保护心血管，橙皮素具有降低血管渗透性的功效，可以起到预防血栓形成的作用。还可以通过刺激某些线粒体酶如琥珀酸脱氢酶等起到保护内皮细胞组织的缺氧作用，预防由内皮细胞坏死引起的凝血而诱发血栓形成。

目前制备橙皮素的方法主要有直接分离法，全合成法，水解法，微生物转化法等。因植物中的橙皮素含量很低使直接分离法得到橙皮素的成本高，收率低，不适于工业化生产；全合成法制备橙皮素的操作繁琐，收率低，成本高，不适合工业化生产；微生物转化法对生产条件要求苛刻，使获得橙皮素的成本高，不适于工业化生产；水解法主要是从芸香科植物（橙、柚、枳实等）中分离出橙皮苷再进行酸水解或是先进行水解在分离出橙皮素，该方法成本适中，但对环境的影响较大，不适于大面积推广。酶解法是近年来用于制备苷类化合物苷元的方法，该方法的优势在于酶解反应专属性高，副产物少，反应条件温和，对产物破坏小，产品收率高，操作简单，且对环境影响小。

如何从药用资源保护及合理利用的角度出发，寻找一种可以最大化的利用植物资源来获得橙皮素的方法，是一项非常有技术价值的研究课题。

发明内容

申请人通过研究发现蜘蛛香是除芸香科植物外橙皮苷含量最高的植物之一，而且目前蜘蛛香的主要药用部位为环烯醚萜类，在提取环烯醚萜类成份后药渣便弃掉，既污染环境又浪费资源。

申请人发现提取蜘蛛香中的环烯醚萜类成份使用的是体积浓度≥90%的高浓度乙醇，而蜘蛛香中所含的橙皮苷是二氢黄酮双糖苷类成分，高浓度乙醇是不能讲其溶解提取的，因此，大量的橙皮苷还保留在提取总萜后的蜘蛛香药渣中。

本发明的目的在于提供一种从提取总萜后的蜘蛛香药渣中获得高纯度橙皮素的方法，且该方法简单易行，收率高，资源利用率高，工业化前景良好。

为了实现上述任务，本发明采用的技术解决方案是：

1）提取：以提取总萜后的蜘蛛香提取渣为原料，用质量浓度5%的氢氧化钙水，在90℃条件下提取2次，第一次加入量为8BV，提取2h，第二次加入量为6BV，提取2h，提取液合并过滤，调节pH值为8～9，备用；

2）纯化：将调节pH值后的提取液上大孔树脂柱，树脂型号为AB-8，pH值为8～9，上样提取液量为5～6倍树脂柱体积，吸附流速1.5BV/h；待吸附饱和后用去离子水冲洗液冲柱，当流出液澄清后，洗后的柱体填料用质量浓度0.8%～1%的氢氧化钠洗脱液洗脱，洗脱液用量为2～3倍树脂柱体积，流速1BV/h，收集洗脱液；

3）酶解：将所得的洗脱液倒入反应釜中，调pH值至4～6后加热到35℃～55℃保温，在保温条件下加入原料中橙皮苷质量3/20～6/20的α-L-鼠李糖苷酶和原料中橙皮苷质量1/20～2/20的β-葡萄糖苷酶，酶解6～10h，酶解反应机理如图1所示。；

4）结晶：将酶解液放冷，离心，得到橙皮素粗品，橙皮素粗品用乙醇重结晶后，即可得浅黄色针状结晶的高纯度橙皮素。