[发明专利]一种快速非热制备稀有人参皂甙Rg3(S)的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种快速非热制备稀有人参皂甙Rg3(S)的方法，特别是涉及高压脉冲电场技术耦合酸水解制备方法。

背景技术

人参（Panax ginseng C.A.Meyer）为五加科（Araliaceae）人参属（Panax）植物，具有多种药理活性，包括降低血脂、免疫调节、抗炎作用、化学预防作用、抗衰老、抗氧化等功能。人参皂甙是人参中主要药理性成分之一，目前从人参中已分离鉴定出80余种人参皂苷单体。

人参皂甙Rg3有S型和R型两种旋光异构体（Fig.1），分别具有不同的生理和生物活性，其中人参皂甙Rg3(S)水溶性和生物活性要高于异构体Rg3(R)。人参皂甙Rg3(S)只存在于红参中，且含量很低，在生参和白参中未检测到人参皂甙Rg3(S)。人参皂苷Rg3(S)在体内外具有抗肿瘤作用、降低血压、神经保护作用、保护肝脏作用和抑制血管痉挛等多种功效。除此之外，Rg3(S)还是人参皂甙Rh2前体，而Rh2具有较强抗癌作用。2000年，国内已经将人参皂甙Rg3(S)作为抗癌药物应用于临床治疗，其药理学机制是抑制肿瘤细胞侵入和转移。

目前，针对稀有人参皂甙在天然人参中含量极低特点，常采用高含量的人参皂甙为原料，通过降解人参皂甙分子中的葡萄糖基，制备高活性的稀有人参皂甙单体。稀有人参皂甙Rg3(S)与人参皂甙Rb1在结构上相差2个葡萄糖基，可通过对人参皂甙Rb1进行糖苷键改造制备人参皂甙Rg3(S)（Fig.1）。1996年Shibata等研究发现，利用醋酸处理人参皂甙可促进Rb1、Rb2、Rc和Rd中C-20糖苷键水解，生成前皂甙配基Rg3，缺点是生成Rg3单体的含量低。Ko等研究表明，与红参中人参皂甙Rg3含量相比，人参提取物经醋酸处理后Rg3含量提高10倍。Yi等利用柠檬酸预处理红参，可以提高人参皂甙Rg3得率。Cheng等利用微生物菌种GS514将人参皂甙Rb1转化生成Rg3。Chang等利用纤维素酶Celluase-12T处理白参提取物，与传统白参提取方法相比，人参皂甙Rg3(S)含量提高4倍。Kim等将两种糖苷水解酶结合使用，可显著提高人参皂甙Rg3(S)产率。综上所述，人参皂甙Rg3(S)制备方法主要包括化学转化法和生物转化法。化学转化法制备人参皂甙Rg3(S)，普遍存在转化率低、副产物多、处理时间长和反应温度高的问题，且高温处理容易引起生物活性丧失。生物转化法包括酶转化和微生物转化，具有反应条件温和，专一性强，产率高等优点。但是酶转化存在酶制备步骤复杂，且成本高特点；微生物转化法存在培养周期长特点。

发明内容

本发明的目的是提出一种高压脉冲电场技术辅助降解人参皂甙Rb1制备稀有人参皂甙Rg3(S)的方法，以克服传统方法制备稀有人参甙Rg3(S)的缺点。

本发明的技术方案是：

在常温下将人参皂甙Rb1酸性溶液混合均匀，直接通入高压脉冲电场进行处理，其电场强度为5-25kV/cm，处理的脉冲数为1-15个，将高压脉冲电场处理后的物料加入有机溶剂离心分离，取上清液，挥发除掉溶剂，即获得人参皂甙Rg3(S)。

所述的酸为盐酸，酸浓度为0.1-2%。

所述有机溶剂使用正丁醇时用水饱和溶液。

本方法由于在酸水解反应过程中引入高压脉冲电场，加速酸水解反应速度，快速、高效地促进人参皂甙Rb1转化生成稀有人参皂甙Rg3(S)。

本发明利用高压脉冲电场辅助降解人参皂甙Rb1，制备高含量稀有人参皂甙Rg3(S)，缩短了反应时间，且不影响其生物活性，具有非热、反应速度快、副产物少和能耗低等优点。附图说明

图1人参皂甙Rb1降解生成人参皂甙Rg3(S)的反应途径。

具体实施方式

结合以下给出的实施例对本发明方法作进一步详细说明。

实施例1

本发明将人参皂甙Rb1降解生成人参皂甙Rg3(S)的方法，是将人参皂甙Rb1样品溶解于1%盐酸溶液中，配制成浓度为1mM人参皂甙Rb1溶液，在常温下直接通入高压脉冲电场进行处理，其电场强度为20kV/cm，脉冲数为10；用水饱和正丁醇萃取反应液，离心分离，上清液挥发除去溶剂，经高效液相色谱分析人参皂甙Rg3(S)的得率为68.58%。

实施例2