[发明专利]一种食用菌孢子的采集培养方法

说明书

技术领域

本发明涉及菌种的采集培养技术领域，具体涉及一种食用菌孢子的采集培养方法。

背景技术

食用菌孢子的采集培养是食用菌分类和遗传育种中重要的操作过程：其方法是在洁净的环境中，收集从新鲜食用菌子实体（菌盖腹部菌褶内）自然弹射出来的孢子，在培养皿中进行萌发培养。现有技术主要采用孢子弹射分离法对孢子进行采集，这种方法需要一套孢子收集器，将钟罩上的孔加上棉塞或包上6-8层纱布，放在垫有4-6层纱布(浸过0.1%升汞液)的塘瓷盘上，纱布上放一培养器，内放一个不锈钢支架；把收集器包装好，按无菌操作要求将采集食用菌种菇移入孢子收集器，种菇插在支架上，在适宜的温度中培养，2-3天后食用菌的孢子散落在培养皿中，加入无菌水，用针筒吸取孢子液，接种在斜面培养基中央，置于22～26℃恒温箱中培养即可。这种方法操作比较复杂，技术不易掌握，并且需要采用专门的孢子收集器，成本较高。

发明内容

针对现有技术中的上述不足，本方法提供了一种食用菌孢子的采集培养方法，该方法不需要专门的孢子收集器进行孢子的采集，操作方法简单。

为了实现上述目的，本方法采用的技术方案如下：

食用菌孢子的采集培养方法，包括如下步骤：

（1）制备培养液：

在不锈钢锅中加入100份自来水和5份麸皮，将自来水和麸皮的混合物搅拌均匀，加热至沸腾，保持沸腾30分钟后，采用四层纱布将麸皮滤出，得到过滤液；在过滤液中加入自来水至100份，倒入不锈钢锅中加热，在加热过程中加入以下配方，搅拌至全部溶化，水温至95^oc-100^oc，即制成培养液，倒入容器中待用。

所述配方为:糖2份、磷酸二氢钾0.15份、硫酸镁0.075份；其中糖为红糖、葡萄糖和麦芽糖中的一种或几种。 

（2）制备孢子收集纸：取一张纸，在纸的中央打印一个圆形图案，并在圆形图案内印上1~2毫米间隔纵横交错的线条，形成多个小方格，沿圆形图案的线条将纸剪成圆形，在圆形纸的中央剪一个直径为2~3厘米的圆孔；然后将剪有圆孔的圆形纸置于培养液中浸泡1-2分钟；最后将浸泡后带有培养液的圆形纸装入塑料袋中灭菌处理，即成孢子收集纸。

（3）选择菇种：选择健壮、菇型标准，菌盖没有完全展开的第一桩菇为种菇。

（4）菇种处理：将种菇置于接种箱中用75％酒精棉球对表面消毒处理，接种箱按常规灭菌。

（5）收集孢子：将消毒处理后的种菇的菇腿插入孢子收集纸中央的圆孔内，使孢子收集纸紧贴种菇的菌褶，经过2-3天时间，种菇的孢子就弹射到孢子收集纸上。

（6）培养孢子：将孢子收集纸按接种需要剪成多个小块或小条，将小块放入试管中培养，即得到第—代试管种，即原种。

与现有技术相比，本发明具有如下优点：

1、孢子的采集可直接在接种箱中操作，不需要采用孢子收集器，节省了孢子收集器的费用，降低了孢子的采集成本。

2、孢子收集纸采用普通纸即可，制作方法简单；将纸放入营养液中浸泡，使纸上浸满营养液，在进行孢子采集时，孢子弹射在孢子收集纸上，由于孢子收集纸上有营养液，有利于孢子萌发。

3、孢子收集纸紧贴种菇菌褶，避免了杂菌的污染。

4、孢子收集纸印有小方格，可方便参照随意剪栽。

5、将收集有孢子的孢子收集纸可根据需要剪成小块，放入试管中培养，方便菌种筛选和提纯。

 

附图说明

图1为本发明孢子收集纸结构示意图。

 

具体实施方式

下面结合附图和具体实施方式对本发明作进一步说明。

食用菌孢子的采集培养方法，包括如下步骤：

（1）制备培养液：

以制备1000ml培养液为例：在不锈钢锅中加入1000ml自来水，再加入50g麸皮，将自来水和麸皮的混合物搅拌均匀，加热至沸腾，沸腾30分钟后，采用四层纱布过滤，将麸皮滤出，剩下的溶液为过滤液。往过滤液再加水至1000ml（补充因蒸发而损失的水份），将补充了自来水的过滤液倒入不锈钢锅中，边加热边倒入按如下配方配制的原料，搅拌至原料全部溶化，水温至95^oc-100^oc，即制成培养液，将培养液倒入容器待用。

其中，配方为：糖20克、磷酸二氢钾1.5克、硫酸镁0.75克。其中糖为红糖、葡萄糖和麦芽糖中的一种或几种。