[发明专利]一种降低茶树组织培养过程中外植体污染的方法

权利要求书

1.一种降低茶树组织培养过程中外植体污染的方法，其特征在于：具体步骤如下：

（1）取春季生长健壮的、带饱满腋芽的茶树茎段为外植体；

（2）将外植体剪成小段，以质量分数为75%的酒精消毒20-25s，无菌水冲洗2遍；用质量分数为0.1%的升汞消毒4min，无菌水冲洗2遍 ；再用质量分数为0.1%的升汞消毒5min，无菌水冲洗3-5遍；

（3）将外植体切口处因消毒变色的部分切下，然后切成1-1.5cm长，带一个腋芽的茎段；

（4）将上述茎段接在含有抗生素的培养基上，每个瓶子接种1-2个茎段，接种后放入培养室中进行培养。

2. 根据权利要求1所述的降低茶树组织培养过程中外植体污染的方法，其特征在于：所述培养基为：MS+1.5 mg/L 6-BA +0.3mg/L NAA+蔗糖30g+琼脂粉6.5g，pH值调至5.6-5.8，配制好的培养基分装在500mL的广口三角瓶中，高温灭菌20min。

3. 根据权利要求1所述的降低茶树组织培养过程中外植体污染的方法，其特征在于：培养基中加入抗生素的组成成分及浓度如下：

氨苄青霉素：200mg/L；

硫酸链霉素：150mg/L。

4. 根据权利要求1所述的降低茶树组织培养过程中外植体污染的方法，其特征在于：所述含抗生素的培养基是将抗生素经微孔过滤器抽滤灭菌后，加入到装有培养基的广口三角瓶中，摇匀后再分装到培养瓶中。

5. 根据权利要求1所述的降低茶树组织培养过程中外植体污染的方法，其特征在于：培养条件为：温度23-25 ℃，光照强度1500-2000lx，光照时间12h/d，培养30d-35d。