[发明专利]从动物胰脏中提取糜蛋白酶的方法无效
| 申请号: | 201310638655.7 | 申请日: | 2013-11-28 |
| 公开(公告)号: | CN103805585A | 公开(公告)日: | 2014-05-21 |
| 发明(设计)人: | 刘乃山;刘君;刘翠珍;刘振海 | 申请(专利权)人: | 青岛康原药业有限公司 |
| 主分类号: | C12N9/76 | 分类号: | C12N9/76 |
| 代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
| 地址: | 266300 山东省青*** | 国省代码: | 山东;37 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 动物 胰脏 提取 蛋白酶 方法 | ||
1.一种从动物胰脏中提取糜蛋白酶的方法,其特征在于,该方法包括如下步骤:
(1)提取工序:将动物的胰脏绞碎成胰浆,用硫酸溶液浸渍,过滤,留取滤液;
(2)盐溶工序:滤液中加入硫酸铵,使硫酸铵的饱和度达到30~50%,静置,过滤,留取滤液;
(3)盐析工序:滤液中加入硫酸铵,使硫酸铵的饱和度达到50~80%,静置,过滤,留取滤饼;
(4)所得滤饼加水溶解,加入饱和硫酸铵溶液,调节pH值至4.0~5.5;
(5)结晶工序:溶液静置至有针状糜蛋白酶结晶析出;
(6)干燥工序:取沉淀物,干燥,即得糜蛋白酶。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤(1)中,硫酸溶液的浓度为0.1~0.2mol/L;胰浆与硫酸溶液的重量比为1∶2~1∶3;浸渍时间是20~28小时。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤(4)中,水与滤饼的重量比为1∶1~3∶1;调节pH值至4.0~6.0;加入的饱和硫酸铵溶液与滤饼的重量比为1∶10~1∶1。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于:步骤(4)中,水与滤饼的重量比为1∶1~2∶1;调节pH值至4.5~5.5;加入的饱和硫酸铵溶液与滤饼的重量比为1∶6~1∶
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤(5)中,溶解静置环境温度为20~30℃;调节pH值至2.0~5.0;每1000ml溶液中加入固体硫酸铵的重量为300~400g。
6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于:步骤(5)中,调节pH值至 3.0~4.0;每1000ml溶液中加入固体硫酸铵的重量为340~370g。
7.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述动物胰脏为新鲜的牛胰脏、新鲜的猪胰脏。
8.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:在步骤(4)之前,还包括将所得滤饼用水溶解,重复步骤(2)和步骤(3)的操作步骤,水与滤饼的重量比为2∶1~5∶1。
9.一种由权利要求1-8任意之一所述的制备方法制备得到的糜蛋白酶。
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