[发明专利]甲型和乙型流感病毒联合检测试剂盒及其应用有效
| 申请号： | 201310638192.4 | 申请日： | 2013-12-02 |
| 公开（公告）号： | CN103614495A | 公开（公告）日： | 2014-03-05 |
| 发明（设计）人： | 朱旭平;朱勤玮;卢忠鹰;王凯;邵俊斌 | 申请（专利权）人： | 上海之江生物科技股份有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/68;C12N15/11;C12R1/93 |
| 代理公司： | 上海光华专利事务所 31219 | 代理人： | 许亦琳;余明伟 |
| 地址： | 201201 上海市浦东新区张江高科*** | 国省代码： | 上海;31 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 流感病毒 联合 检测 试剂盒 及其 应用 | ||
1.一种针对甲型和乙型流感病毒的双重荧光PCR检测用引物及探针，其特征在于，所述引物和探针的组成如下：
甲型流感病毒
IFVA上游引物:5’-GCTCTCATGGAGTGGMTA-3’
IFVA下游引物:5’-CGTGAACACAAAYCCYAA-3’
IFVA探针：5’-荧光报告基团-ACAAGACCAATCCTGTCACCTCTG-荧光淬灭基团-3’
乙型流感病毒
IFVB上游引物:5’-GTTGGTTTGGTGGGAAAG-3’
IFVB下游引物:5’-GATAAGGGYTCTGTGATGAA-3’
IFVB探针：5’-荧光报告基团-TGACCTAGACTCTGCCTTGGAATG-荧光淬灭基团-3’
其中，M=A/C，Y=T/C。
2.一种甲型和乙型流感病毒联合检测试剂盒，包括甲乙型流感病毒检测混合液，所述甲乙型流感病毒检测混合液中含有权利要求1所述针对甲型和乙型流感病毒的双重荧光PCR检测用引物及探针。
3.如权利要求2所述的甲型和乙型流感病毒联合检测试剂盒，其特征在于，所述甲乙型流感病毒检测混合液中还含有RT-PCR MIX和H2O。
4.如权利要求2所述的甲型和乙型流感病毒联合检测试剂盒，其特征在于，所述甲乙型流感病毒检测混合液的组成为：IFVA上游引物0.75μl/test；IFVA下游引物0.75μl/test；IFVA探针0.1μl/test；IFVB上游引物0.75μl/test；IFVB下游引物0.75μl/test；IFVB探针0.1μl/test；RT-PCR MIX12.5μl/test；双蒸水3.3μl/test。
5.如权利要求2所述的甲型和乙型流感病毒联合检测试剂盒，其特征在于，所述双重PCR检测试剂盒还包括RT-PCR酶、阴性对照品、阳性对照品中的至少一种。
6.如权利要求5所述的甲型和乙型流感病毒联合检测试剂盒，其特征在于，所述阳性对照品为含有SEQ ID NO：7所示IFVA目的扩增片段的质粒，和/或含有SEQ ID NO：8所示IFVB目的扩增片段的质粒。
7.如权利要求2所述的甲型和乙型流感病毒联合检测试剂盒，其特征在于，所述双重PCR试剂盒所采用的荧光PCR法的PCR检测体系如下：
甲乙型流感病毒检测混合液 19μl
RT-PCR酶 1μl
待测品 5μl
反应总体系为25μl。
8.如权利要求2所述的甲型和乙型流感病毒联合检测试剂盒，其特征在于，所述待测品为样本核酸提取液、阳性对照品或阴性对照品。
9.如权利要求2所述的甲型和乙型流感病毒联合检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒的PCR扩增程序为：45℃10min；95℃15min；95℃15sec和60℃60sec交替循环45次。
10.权利要求1所述针对甲型和乙型流感病毒的双重荧光PCR检测用引物及探针，权利要求2-9任一权利要求所述甲型和乙型流感病毒联合检测试剂盒在制备甲型和/或乙型流感病毒检测试剂中的应用。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于上海之江生物科技股份有限公司，未经上海之江生物科技股份有限公司许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201310638192.4/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
