[发明专利]一种从脱脂米糠中制备高含量米糠蛋白的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种米糠蛋白的制备方法，尤其是涉及一种从脱脂米糠中制备高含量米糠蛋白的方法。

背景技术

米糠蛋白是公认优质植物蛋白质，其必需氨基酸组成平衡合理，接近FAO/WHO推荐模式；其中赖氨酸含量较高，为其它植物蛋白无法比拟，米糠蛋白生物效价很高其营养价值可与鸡蛋、牛乳相媲美，消化率可达90%以上；且米糠蛋白是低过敏性蛋白，不会产生过敏反应，因此，米糠蛋白非常适合作为婴幼儿和特殊人群营养食品。

目前米糠蛋白的提取方法主要有三种，包括碱溶酸沉法、酶法和物理提取法，报道的较多的是利用酶法直接提取米糠蛋白或多次利用碱溶酸沉法提取蛋白以达到提高蛋白含量的目的，现有技术的不足之处是：操作复杂，米糠蛋白提取率低，所提取的米糠蛋白含量不高，本研究则是在传统的碱溶酸沉方法基础上，利用碱性蛋白酶对其预处理以提高蛋白的提取率，用糖化酶对取到的米糠蛋白进行纯化，以大幅度提高米糠蛋白含量（含量可达85%），方法简单易行。

发明内容

本发明的目的在于解决现有技术的米糠蛋白提取方法操作复杂，米糠蛋白提取率低，所提取的米糠蛋白含量不高的不足，提供一种从脱脂米糠中制备高含量米糠蛋白的方法。该方法提取率高，可以大幅度提高米糠蛋白的含量。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：

一种从脱脂米糠中制备高含量米糠蛋白的方法，包括如下步骤：

（1）预处理：将脱脂米糠按照料水质量比1:10～12加入水并混合均匀，调节pH值至10.5～10.8，加入适量碱性蛋白酶于40～45℃恒温酶解0.5～1h，酶解结束后灭酶；

（2）碱提：将步骤（1）预处理后的料液升温至55～60℃，维持pH10.5～10.8，碱提2～3h，然后离心获得上清液；

（3）酶解：将步骤（2）的上清液调pH值至4.6，静置1～1.5h使米糠蛋白沉淀，然后离心分离得浆状米糠蛋白沉淀，所述浆状米糠蛋白沉淀加适量水搅拌均匀，使得米糠蛋白的质量分数为25%，调节pH至4.4～4.6，加入适量的糖化酶，于58～65℃酶解1.5～2h，酶解完成后灭酶，再次离心分离得浆状米糠蛋白，所述浆状米糠蛋白经过冷冻干燥得到粉末状米糠蛋白产品。发明人经过研究发现，糖化酶酶解过程中作为底物的米糠蛋白的质量分数对酶解效果及米糠蛋白产品的蛋白质含量的高低有重要影响，底物浓度过高，不利于可溶性糖的溶解分离，导致米糠蛋白产品的蛋白质含量偏低；当底物浓度过低，则酶解效率差，也降低了生产效率，因此，本发明糖化酶酶解过程选择米糠蛋白的质量分数为25%，一方面保证了糖化酶酶解效果，另外酶解液中可溶性糖易于分离，米糠蛋白产品的蛋白质含量可以显著提高，以满足食品领域应用的要求，提高了米糠蛋白产品的应用价值。

作为优选，步骤（1）中碱性蛋白酶的添加量为脱脂米糠质量的0.4～0.5%，所述碱性蛋白酶的酶活为20万U/g。

作为优选，步骤（3）中糖化酶的添加量为米糠蛋白沉淀干基质量的0.5%，所述糖化酶的酶活为15万U/g。随着加酶量的增加，米糠蛋白产品的蛋白质含量不断升高，但综合考虑糖化酶的利用率和经济成本，本发明糖化酶的添加量选为米糠蛋白沉淀干基质量的0.5%，即750U/g底物，此时糖化酶的利用率最高，酶解效果最好。

作为优选，步骤（3）中糖化酶酶解重复操作两次。通过两次糖化酶酶解，能使米糠蛋白产品的蛋白质含量进一步提高达到90%，米糠蛋白的纯度显著提高，使其非常适合作为婴幼儿和特殊人群营养食品。

作为优选，步骤（3）中糖化酶酶解的pH值为4.5，酶解温度为60℃，酶解时间为1.5h。温度在60℃左右时，所得产品的蛋白含量最高。糖化酶酶解温度过低过高都会抑制糖化酶的活性，导致酶解反应速率变慢，糖类杂质得不到很好的去除，从而使蛋白质含量偏低，当酶解温度为60℃时，所述米糠蛋白产品的蛋白质含量最高；pH过高或过低都会抑制糖化酶的活性，导致米糠蛋白产品的蛋白质含量偏低，经过研究发现，当pH值在4.5左右时，所得米糠蛋白产品的蛋白质含量最高；随着酶解时间的延长，米糠蛋白产品的蛋白质含量显著上升，但到了1.5h之后，由于蛋白液中的糖类杂质大部分已被去除，再延长酶解时间已很难再提高蛋白含量，延长酶解时间米糠蛋白产品的蛋白质含量不会有太大变化，因此确定酶解时间为1.5h。

作为优选，步骤（1）中灭酶温度为90℃，时间为10min，步骤（2）中离心的转速为4000～4500rpm，离心时间为20～25min。