[发明专利]一种环酯肽Orfamide A的固相合成方法

权利要求书

1.一种固相合成环酯肽Orfamide A的方法，包括如下步骤：

1）Fmoc-D-Ser-OAll与固相载体树脂合成，获得Fmoc-D-Ser(树脂)-OAll；

2）Fmoc-D-Ser(树脂)-OAll采用逐一偶联的方式依次偶联Leu、Leu、D-Ser、Leu、D-allo Ile、Thr，并在Thr的侧链羟基上偶联Val，脱除Val氨基保护基Alloc及Ser上的羧基保护基All，在树脂上形成环肽，然后依次继续偶联D-Glu、Leu、3-羟基十四烷酸，获得Orfamide A-肽树脂；

3）Orfamide A-肽树脂经裂解反应，获得Orfamide A粗肽；

4）Orfamide A粗肽经纯化、转盐和冻干后获得Orfamide A纯品。

2.根据权利要求1所述的方法，其中步骤1）中所述的固相载体树脂为DHP HM树脂。

3.根据权利要求2所述的方法，其中DHP HM树脂与D-Ser偶联的位置为侧链的羟基。

4.根据权利要求1或2所述的方法，其中步骤1）中获得的Fmoc-D-Ser(树脂)-OAll的替代度为0.2～0.5mmol/g。

5.根据权利要求1或2所述的方法，其中步骤2）中所述的逐一偶联的方式中偶联Thr后，其氨基保护基Fmoc不能预先脱除。

6.根据权利要求1或2所述的方法，其中步骤2）中所述的Val与Thr偶联的位置为Thr的羟基，而Val的氨基保护基为Alloc。

7.根据权利要求1或2所述的方法，其中步骤2）中所述的Val与Thr形成酯键的偶联体系为DIC/HOBt/DMAP或PyBOP/HOBt/DMAP/DIPEA。

8.根据权利要求1或2所述的方法，其中步骤2）中所述的All和Alloc保护基团脱除的试剂为Pd(PPh₃)₄和苯基硅烷。

9.根据权利要求1或2所述的方法，其中步骤2）中所述的树脂上成环的偶联体系为HATU/HOAt/DIPEA或PyBOP/HOBt/DIPEA。

10.根据权利要求1或2所述的方法，其中步骤3）中所述的裂解反应所采用的裂解试剂为TFA:TIS:H₂O=90～98:0～5:2～5（V:V），优选为TFA:TIS:水=90:5:5(V/V)、TFA:水=98:2(V/V)、TFA:TIS:水=95:2:3(V/V)或TFA:TIS:水=94:3:3(V/V)。

11.根据权利要求1或2所述的方法，其中步骤4）中所述的纯化方法为反相高效液相色谱纯化法，色谱柱为反相C18柱。