[发明专利]一株抗核桃溃疡病的核桃内生菌菌株及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及微生物及其应用领域，特别涉及一株对核桃溃疡病菌有拮抗作用的内生菌及其在防治核桃溃疡病中的应用。 

背景技术

植物内生菌是指生活史的一定阶段或全部阶段生活于健康植物的各种组织和器官内部的微生物。内生菌因溶磷、固氮、产生植物激素、诱导抗虫抗病、抗逆等强大生理和生态功能而倍受关注。近年来发现，许多植物内生菌还能够产生具有农药活性的次生代谢产物，引起了人们巨大的兴趣。从微生物中寻找发现新型先导化合物，是新农药研制的重要途径。由于内生细菌在植物体内具有稳定的生存空间，不易受环境条件的影响，可以在植物体内繁殖和传递，使之成为生物防治中极具潜力的微生物农药、增产菌或作为潜在的生防载体菌。 

中国核桃产业近年来发展迅猛，但由于大规模集中连片的栽培方式，加之树体高大、林内郁闭、通风条件差，使得以核桃溃疡病（Botryosphaeria dothidea）等为代表的树干部病虫害迅速蔓延、发生面积大。其危害造成树势迅速衰弱、死亡。核桃溃疡病是核桃树干上的一种常见病害，早在上世纪的1915年，美国加利福尼亚州即已发现此病，在国内如陕西、河北、河南、山东、江苏、安徽等省均有其分布。病株率一般为20％-40％，重病区可达70％以上，不仅影响当年的产量，而且削弱树势，导致过早衰亡。本病除为害核桃外，还发生于垂柳、刺槐、枫杨、中槐、苹果及多种杨树。 

对于核桃溃疡病的防治，目前生产上主要依靠林业栽培管理措施和化学农药进行防治。但由于该病发病初期隐藏潜伏于树皮下危害，侵染初期树皮表面危害症状不明显，果农易忽视其存在，又因其具有较长的潜伏期、较长的发病 周期和多点危害的特点，在防治中需要一个生长周期多次处理、多次施用化学农药，才能较好的控制其危害。存在防治成本高、耗时长、污染环境等问题。寻求新的经济高效、绿色环保的防治技术与途径已成为当前核桃溃疡病防治中迫切解决的问题。关于利用具有生防作用的内生菌来进行植物病害的防治生产上已有成功的案例，研究开发针对核桃溃疡病防治的内生菌是治疗该病的一条值得期待的新途径。 

发明内容

本发明的目的在于，提供一种抗核桃溃疡病的核桃内生菌菌株（Bacillus subtilis strain WB1）及其应用，并通过试验证明该菌株WB1能够用于防治核桃溃疡病。 

为了实现上述任务，本发明采取如下的技术解决方案： 

一种抗核桃溃疡病的核桃内生菌菌株，其特征在于，该抗核桃溃疡病的核桃内生菌菌株命名为枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis strain WB1）菌株，在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏号为CGMCC No.8439。 

经测定，该枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis strain WB1）菌株的16SrDNA序列如下所示： 

   1 gcctgagggg gctgacttac gtgcgagtcg agcggacaga tagggtagct tgctccctga 

  61 tgttagcggc ggacgaggtg agtaacacgt gggtaacctg cctgtaagac tgggataact 

 121 ccgggaaacc ggggctaata ccggatggtt gtttgaaccg catggttcaa acataaaagg 

 181 tggcttcggc taccacttac agatggaccc gcggcgcatt agctagttgg tgaggtaacg 

 241 gctcaccaag gcaacgatgc gtagccgacc tgagagggtg atcggccaca ctgggactga 

 301 gacacggccc agactcctac gggaggcagc agtagggaat cttccgcaat ggacgaaagt 

 361 ctgacggagc aacgccgcgt gagtgatgaa ggttttcgga tcgtaaagct ctgttgttag 

 421 ggaagaacaa gtaccgttcg aatagggcgg taccttgacg gtacctaacc agaaagccac 

 481 ggctaactac gtgccagcag ccgcggtaat acgtaggtgg caagcgttgt ccggaattat