[发明专利]载纳米雄黄磁性白蛋白纳米球及制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种既可作为磁共振成像造影剂又可对肿瘤进行治疗的载药磁性白蛋白纳米球及其制备方法。

背景技术

雄黄属于硫化物类含砷矿物中药，对急性早幼粒细胞白血病、慢性粒细胞白血病、多发性骨髓瘤等恶性血液系统疾病疗效显著，对一些实体瘤细胞，体外实验也证实具有抑制生长和诱导凋亡作用，如肝癌细胞系、乳腺癌多药耐药细胞系、骨肉瘤细胞等。庞琦等的研究已发现雄黄对体外培养的鼠胶质瘤细胞有明显抑制作用，且在动物体内实验中证明局部用药有效，用药3周后，75％的种植瘤消失，3个月内的复发率为仅为8.3％，提示雄黄治疗肿瘤前景光明。与亚砷酸注射液相比，雄黄毒副作用较小，但其传统制剂工艺都是以研磨、水飞的形式，存在工业生产速度慢、颗粒偏大、生物利用度较低等缺点，长期或大剂量使用仍然会出现许多不良反应。若能通过改进传统制剂工艺、采用现代技术制备新型含砷中药，从而提高生物利用度、减少药物用量、降低毒副作用并提高疗效将具有重要的临床意义。砷制剂已从传统的制剂工艺和给药途径中迈出了可喜的一步，新型的含砷纳米中药抗肿瘤效应明显优于传统剂型的砷类中药，显示了在肿瘤治疗方面具有较好的应用前景，有望成为砷剂治疗肿瘤的新剂型，为砷剂的临床应用开辟了新途径，也为传统中药在抗肿瘤纳米医药的发展上提供了新的思路和方法。

热疗是一种古老但很有前景的肿瘤治疗方法，它是一类利用各种物理能量（如微波、射频和超声波等）在人体组织中所产生的热效应，使组织细胞温度升至43 ℃以上的有效治疗温度，加速肿瘤细胞死亡的疗法。自临床应用以来，显示出许多优点。首先，它本身的副作用极小而被称为绿色疗法；其次，将热疗与放疗或化疗结合使用，不仅可以减少放、化疗药物剂量，从而减少放、化疗副作用，而且可以实现全周期、全空间对癌细胞的杀伤，大大提高疗效。90年代初，Jordan等发现纳米级氧化铁粒子有很高的热效应，在可以临床使用的磁场强度和频率范围内，其热效应比微米级的磁粒子高得多，据此Jordan等采用了纳米技术和热疗相结合的磁流体热疗（MFH）治疗肿瘤取得重要进展。

氧化铁纳米粒子具有超顺磁性、良好的生物相容性和高灵敏性，被认为是一种良好的磁共振成像造影剂。由于其适中的纳米尺度和肿瘤组织透过性增强及滞留（EPR）效应，氧化铁纳米粒子能够在肿瘤组织富集，因而在磁共振肿瘤成像领域具有巨大的应用前景。然而，作为纳米材料，氧化铁纳米粒子在血液循环系统中容易被血浆中的调理素非特异性吸附，进而被网状内皮系统（RES）快速识别和摄取，大量的滞留在肝脾等器官。这会降低氧化铁纳米粒子在肿瘤部位的富集，从而影响肿瘤成像的效果。与巨噬细胞被动靶向的葡聚糖包被的四氧化三铁纳米颗粒比较，本发明所用的载药磁性白蛋白纳米球具有能够降低血浆蛋白结合率，减少网状内皮系统清除率，增加循环时间的优点，因而更适用于肿瘤的的分子影像学研究

本发明的载纳米雄黄磁性白蛋白纳米球通过白蛋白纳米球集热疗、化疗、热控释、磁靶向等优点为一体，为肿瘤的治疗开拓了新的思路。此新型的纳米运载体除了作为治疗载体，还可进行体内磁共振成像研究，为临床应用研究提供可靠的实验研究数据及理论基础。

发明内容

技术问题：本发明的目的是提供一种同时包裹化疗药物（纳米雄黄）、磁粒（四氧化三铁纳米粒）的载纳米雄黄磁性白蛋白纳米球，同时提供一种简单易行的制备上述载纳米雄黄磁性白蛋白纳米球的方法。       

技术方案：本发明的载纳米雄黄磁性白蛋白纳米球的制备方法，包括以下步骤：    

按照质量比2.5：1至6：1称取牛血清白蛋白、Fe₃O₄磁性纳米粒，将二者放入去离子水中，配置成牛血清白蛋白浓度为10mg/ml至24 mg/ml的混合液，按照纳米雄黄与Fe₃O₄磁性纳米粒质量比为1：200，将纳米雄黄滴加到上述混合液中，充分搅拌混匀，调节pH值为碱性，在磁力搅拌下缓慢加入无水乙醇，直至溶液出现浑浊，然后缓慢加入戊二醛固化，搅拌8小时以上，将反应液倒入离心管内超高速离心，用去离子水洗涤后即得到载纳米雄黄磁性白蛋白纳米球。

本发明方法的一个优选方案中，牛血清白蛋白与Fe₃O₄磁性纳米粒的混合液中，牛血清白蛋白浓度为10 mg/ml。

本发明方法的一个优选方案中，纳米雄黄是采用化学共沉淀法制备的，具体步骤为：