[发明专利]一种橄榄苦苷对照品的制备方法

说明书

(一)技术领域

本发明属化工技术领域，特别涉及一种橄榄苦苷对照品的制备方法。

(二)背景技术

橄榄苦苷存在于植物油橄榄中，具有良好的降血脂、抗氧化、抗菌作用。我国目前已大量引种栽培油橄榄，盛产含橄榄苦苷的原料，以油橄榄为原料的各种保健品、化妆品、药品纷纷面市。但目前制备橄榄苦苷的方法为用50％的甲醇提取粉碎的橄榄叶，然后挥去溶剂。其水溶液用氯仿萃取，水层经氯化钠饱和后过滤，再用乙酸乙酯萃取。

分离：利用低压柱用10％、20％、35％、40％、70％、100％不同浓度乙醇洗脱；橄榄苦苷在35％左右得到。

现有技术中存在的不足如下：

1.分离步骤较多且较为繁琐，低压柱分离效果不佳，所得到的产品纯度低，且严重影响收率。

2.在分离过程中，使用了毒性较强的氯仿等溶剂，易造成环境污染，且不利于操作人员的健康。

3.在分离过程中，由于没有采取保护措施，因橄榄苦苷极不稳定，影响取得高纯度的对照品。

目前尚无有效监测橄榄苦苷含量的方法，一般只能以油橄榄含量来评价橄榄苦苷含量，由于不同产地、不同条件生产的油橄榄，其橄榄苦苷含量是有很大差别的，故而这种评价也是不准确的。

(三)发明内容

本发明的目的在于制备一种橄榄苦苷对照品的制备方法，

已知有关橄榄苦苷的提取工艺流程如下：

经查询，尚未有与本发明近似的橄榄苦苷提取、纯化工艺。

本发明的目的在于提供一种橄榄苦苷对照品的制备方法，填补国内未有此对照品生产的空白，并且工艺比较简单，可以从含橄榄苦苷的原料中提取得到含量为98％以上的橄榄苦苷，可作为含橄榄苦苷的植物原料及成品中定性定量的对照品。

将含橄榄苦苷的干燥橄榄叶置于容器中，加入甲醇，经过适当提取方法提取后，减压浓缩挥去甲醇，沉淀加水溶解，其水溶液经氯化钠饱和后，滤过，滤液经乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯再饱和氯化钠溶液洗涤；提取物上于中压柱分离，用不同浓度的乙醇(水：乙醇，1：0—100)洗脱，分部收集，结合TLC检测，减压浓缩，即得橄榄苦苷粗品；将从中压柱洗脱下来的橄榄苦苷经葡聚糖柱进一步分离纯化得到橄榄苦苷晶体(纯度＞98％)。

本发明的优点是：整个工艺简单流程短，易于掌握，且收率高，所用的溶剂毒性很小，对生产操作及环境保护都有利。

(四)附图说明

图1为本发明橄榄苦苷(Oleuropein)HPLC色谱图

(五)具体实施方式

试验例：

取干燥橄榄叶100g，分别3次加80％甲醇500、300、300ml，超声提取30分钟，过滤，滤液在50度减压浓缩；沉淀加水溶解，其水溶液经氯化钠饱和后，滤过，滤液经乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯再饱和氯化钠溶液洗涤；提取物上于ODS中压柱分离，用10％、20％、25％、30％、40％、45％、50％、100％不同浓度乙醇洗脱；分部收集，结合TLC检测，将25％乙醇洗脱部分，减压浓缩，即得橄榄苦苷粗品；将从中压柱洗脱下来的橄榄苦苷经葡聚糖柱进一步分离纯化得到橄榄苦苷晶体(纯度＞98％)。

结构鉴定：

1.物理形状：

橄榄苦苷(Oleuropein)为米白色粉末，易溶于乙醇、甲醇、丙酮、吡啶、冰醋酸和50％的氢氧化钠溶液，溶于水、醋酸乙酯，几乎不溶于乙醚、石油醚、氯仿和苯。

2.波谱鉴定：

2.1质谱鉴定：由谱图得出，该化合物分子量为540左右，与文献值相符。

2.2NMR鉴定：