[发明专利]豆科植物根系组织特异性启动子及其应用

权利要求书

1.一种启动子元件，所述启动子元件选自下组：

(a)核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示的多核苷酸；

(b)核苷酸序列与SEQ ID NO:1所示序列的同源性≥95%(较佳地≥98%)，且具有豆科植物根系组织中特异启动功能的启动子活性的多核苷酸；

(c)如SEQ ID NO:1所示多核苷酸的5’端和/或3’端截短或增加1-60个(较佳地1-30，更佳地1-6个)核苷酸，且具有豆科植物根系组织中特异启动功能的启动子活性的多核苷酸。

2.一种构建物，所述构建物含有外源基因以及与外源基因可操作连接的权利要求1所述的启动子元件。

3.一种表达盒，所述表达盒从5’至3’依次具有下述元件：权利要求1所述的启动子元件、基因ORF序列和终止子。

4.一种载体，所述载体含有权利要求1所述的启动子元件、或权利要求3所述的表达盒。

5.一种宿主细胞，所述宿主细胞含有权利要求4所述的载体、或其染色体上整合有外源的权利要求1所述的启动子元件、或其染色体上整合有权利要求3所述的表达盒。

6.权利要求1所述的启动子元件，权利要求2所述的构建物，权利要求3所述的表达盒的用途，用于特异性调控外源基因在豆科植物根系组织中的表达。

7.一种在豆科植物根系组织中特异性表达外源基因的方法，所述方法包括以下步骤：

(a)提供一构建物，所述构建物含有外源基因以及与该外源基因可操作连接的权利要求1所述的启动子元件；

(b)将步骤(a)得到的构建物导入豆科植物细胞，获得转化的豆科植物细胞；

(c)将步骤(b)中转化的豆科植物细胞再生成豆科植株，从而使所述外源基因在豆科植物根系组织中特异性表达。

8.一种制备转基因豆科植物的方法，所述方法包括以下步骤：

(a)提供下述豆科植物细胞，所述豆科植物细胞含有权利要求4所述载体、或其染色体整合有权利要求1所述启动子、或其染色体整合有权利要求3所述表达盒；

(b)将(a)的豆科植物细胞再生为豆科植株，从而获得转基因豆科植物。

9.一种豆科植物愈伤组织或豆科植物体细胞，所述豆科植物愈伤组织或豆科植物体细胞包含下述豆科植物细胞或由下述豆科植物细胞构成：所述豆科植物细胞含有权利要求4所述的载体、或其染色体整合有权利要求1所述的启动子元件、或其染色体整合有权利要求3所述的表达盒。