[发明专利]一种牛蛙抗菌肽CRC及其改造体、编码核酸和应用

说明书

技术领域

本发明属于生物医学技术领域，具体涉及一种牛蛙抗菌肽CRC及其改造体、编码核酸和应用。

背景技术

近年来，随着传统抗生素的大规模和不恰当使用，微生物对传统抗生素产生了越来越强的耐受性。医学界对微生物耐药性的应对手段是使用对耐药微生物尚未使用过的新的或者替代性的抗生素。这就需要持续开发新的抗微生物剂。抗菌肽是一种小分子多肽，对细菌、真菌、病毒和原虫等均具有杀灭作用。抗菌肽具有分子量小、结构简单、杀菌活性强、杀菌机制独特，不易引起耐药性等优点，因此具有很大的开发应用前景。目前已从不同的无尾目动物皮肤中分离到300多条不同的抗菌肽，并且其数目还在增加。本发明是提供一种从牛蛙体内发现的具有广谱高效的抗菌活性、极低的细胞毒性和溶血活性的新抗菌肽CRC，以及编码这条多肽的核酸序列，并提供一批具有抗菌活性的CRC改造体多肽，以及编码这些多肽的多核苷酸。

发明内容

本发明目的是：提供一种从牛蛙体内发现的具有广谱高效的抗菌活性、极低的细胞毒性和溶血活性的新抗菌肽CRC，以及编码这条多肽的核酸序列，并提供一批具有抗菌活性的CRC改造体多肽，以及编码这些多肽的多核苷酸。

本发明的技术方案是：一种牛蛙抗菌肽CRC，其特征在于：所述牛蛙抗菌肽CRC由28个氨基酸残基组成，分子量3282.2Da，等电点10.32，其氨基酸序列为：

Lys¹Lys²Cys³Lys⁴Phe⁵Phe⁶Cys⁷Lys⁸Val⁹Lys¹⁰Lys¹¹Lys¹²Ile¹³Lys¹⁴Ser¹⁵Ile¹⁶Gly¹⁷Phe¹⁸Gln¹⁹Ile²⁰Pro²¹Ile²²Val²³Ser²⁴Ile²⁵Pro²⁶Phe²⁷Lys²⁸，其中Cys³和Cys⁷之间形成一对分子内二硫键。

一种基于上述牛蛙抗菌肽CRC的具有抗微生物活性的改造体多肽，以牛蛙抗菌肽CRC的氨基酸序列为模板，通过设计改造获得的具有抗微生物活性的改造体多肽：包含以下氨基酸序列：X1-X2-X3-X4-X5-X6-X7-X8-X9-X10-X11-X12-X13-X14-X15-Ile¹⁶Gly¹⁷Phe¹⁸Gln¹⁹Ile²⁰Pro²¹Ile²²Val²³Ser²⁴Ile²⁵Pro²⁶Phe²⁷Lys²⁸，

其中，

X1=Lys或Arg；

X2=Lys,Phe,Ile,Trp,Ser,Ala,Thr,Val,Leu或Gly;

X3=Cys,Phe,Ile,Trp,Ser,Ala,Thr,Tyr,Val,Leu或Gly；

X4=Lys或Arg；

X5=Phe,Ala,Gly或Val;

X6=Phe,Ile,Trp,Val或Leu;

X7=Cys,Ser,Lys,Arg,Ala或Gly；

X8=Lys或Arg；

X9=Val,Phe,Trp,Leu或Ile;

X10=Val,Phe,Trp,Leu或Ile;

X11=Lys,Arg或Gly；

X12=Lys，Arg或Gly；

X13=Phe,Ile,Trp,Ser,Ala,Thr,Val，Leu或Ile；

X14=Gly,Lys,Arg,Ala或Ser；

X15=Ser,Lys,Arg,Gly或Ala。