[发明专利]电泳用预制胶基片、基于基片的聚丙烯酰胺凝胶预制胶及其使用方法有效
| 申请号: | 201310615864.X | 申请日: | 2013-11-27 |
| 公开(公告)号: | CN103698381A | 公开(公告)日: | 2014-04-02 |
| 发明(设计)人: | 杰弗瑞·陈 | 申请(专利权)人: | 杰弗瑞·陈 |
| 主分类号: | G01N27/447 | 分类号: | G01N27/447 |
| 代理公司: | 温州瓯越专利代理有限公司 33211 | 代理人: | 陈加利 |
| 地址: | 美国印第安纳州西*** | 国省代码: | 美国;US |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 电泳 预制 胶基片 基于 聚丙烯酰胺 凝胶 及其 使用方法 | ||
1.一种电泳用预制胶基片,其特征在于:包括基片主体和梳齿,所述的基片主体包括前面板和后面板,该前面板和后面板之间相互可拆卸拼合构成带有灌注口且厚度一致的凝胶灌注腔,所述的梳齿包括有梳齿基体以及并排间隔设置在梳齿基体前端的多个成型凸条,所述成型凸条的厚度不大于凝胶灌注腔的厚度,所述的基片主体上相对凝胶灌注腔的底部设置有与凝胶灌注腔相连通的电泳导电口,该电泳导电口上可拆卸密封设置有封片,所述的梳齿的成型凸条插入于灌注口内侧的凝胶灌注腔内,且该梳齿的梳齿基体与灌注口封闭配合。
2.根据权利要求1所述的一种电泳用预制胶基片,其特征在于:所述的前面板和后面板之间的可拆卸拼合的部位通过超声键合方式构成可拆卸拼合。
3.根据权利要求1或2所述的一种电泳用预制胶基片,其特征在于:所述的后面板内侧面的两侧边以及底边上设置有相互连贯的第一凸边,所述的前面板内侧面的两侧边以及底边上设置有相互连贯的第二凸边,该第二凸边的外廓与第一凸边的内廓相适配,且第二凸边嵌配设置于第一凸边的内侧。
4.根据权利要求3所述的一种电泳用预制胶基片,其特征在于:所述后面板相对第一凸边的外侧设置有多个拆卸受力槽。
5.根据权利要求3所述的一种电泳用预制胶基片,其特征在于:所述的前面板对应灌注口的位置设置有开孔槽,所述的梳齿基体对应前面板这一侧的端面上凸起设置有与开孔槽的底壁限位配合的定位凸块。
6.根据权利要求3所述的一种电泳用预制胶基片,其特征在于:所述第二凸边对应前面板内侧面的两侧边的头端设置有斜导向壁,所述的梳齿基体的两侧壁与第二凸边的斜导向壁导向密封适配设置。
7.根据权利要求6所述的一种电泳用预制胶基片,其特征在于:所述的梳齿基体的两侧壁上设置有凸筋,所述的第二凸边的斜导向壁上设置有与凸筋定位嵌配的定位凹槽。
8.一种基于权利要求1所述的基片的聚丙烯酰胺凝胶预制胶,其特征在于:在基片的凝胶灌注腔内灌注设置位于底层的聚丙烯酰胺分离胶和位于上层的聚丙烯酰胺成层胶,所述的梳齿的成型凸条插入到聚丙烯酰胺成层胶的外端面内,并在聚丙烯酰胺成层胶的外端面内形成样品装填孔。
9.根据权利要求8所述的一种基于基片的聚丙烯酰胺凝胶预制胶,其特征在于:所述的聚丙烯酰胺分离胶由分离胶混合溶液凝固成凝胶而成,该分离胶混合溶液包括有以下组分:
丙烯酰胺混合液 质量体积分数为6%-15%,丙烯酰胺混合液中丙烯酰胺和甲叉丙烯酰胺质量比为36-39:1;
1.5M pH为8.8的Tris-HCl缓冲液 体积分数23-25%; ,
十二烷基硫酸钠 质量体积分数1-2%;
过硫酸铵 质量体积分数0.5-1%;
四甲基乙二胺或β-二甲基氨基丙腈 体积分数0.04%-0.08%;
余量为水 。
10.根据权利要求8所述的一种基于基片的聚丙烯酰胺凝胶预制胶,其特征在于:所述的聚丙烯酰胺成层胶由成层胶混合溶液凝固成凝胶而成,该成层胶混合溶液包括有以下组分:
丙烯酰胺混合液 质量体积分数为5%,丙烯酰胺混合液中丙烯酰胺和甲叉丙烯酰胺质量比为36-39:1;
1M pH为6.8的Tris-HCl缓冲液 体积分数11-13%; ,
十二烷基硫酸钠 质量体积分数0.05-0.15%;
过硫酸铵 质量体积分数0.05-0.15%;
四甲基乙二胺或β-二甲基氨基丙腈 体积分数0.05-0.15%;
余量为水 。
11.一种如权利要求8所述的基于基片的聚丙烯酰胺凝胶预制胶的使用方法,其特征在于包括以下步骤:
(1)拔下梳齿,并取下封片,露出电泳导电口,在样品装填孔中装入电泳样品和Tris-甘氨酸电泳缓冲液,然后将其装入电泳装置中,在Tris-甘氨酸电泳缓冲液中电泳;
(2)电泳完成后,拆开基片的前面板和后面板,并将凝胶灌注腔中的凝胶取出,进行凝胶染色和成像。
12.根据权利要求11所述的一种基于基片的聚丙烯酰胺凝胶预制胶的使用方法,其特征在于:所述的Tris-甘氨酸电泳缓冲液通过以下工艺配置:Tris 6g、甘氨酸28.8g,加蒸馏水850ml,调pH至8.3,加蒸馏水到1000ml。
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