[发明专利]一种鱼鳞Ⅰ型胶原蛋白肽的规模化制备方法有效
| 申请号: | 201310610827.X | 申请日: | 2013-11-26 |
| 公开(公告)号: | CN104140992B | 公开(公告)日: | 2018-10-09 |
| 发明(设计)人: | 陈思谨;易瑞灶;陈晖;郭洪辉;谢全灵;陈俊德;孙继鹏;郑美华;高然;许诺华 | 申请(专利权)人: | 国家海洋局第三海洋研究所 |
| 主分类号: | C12P21/06 | 分类号: | C12P21/06;C07K1/34 |
| 代理公司: | 厦门市首创君合专利事务所有限公司 35204 | 代理人: | 张松亭 |
| 地址: | 361000 福*** | 国省代码: | 福建;35 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 鱼鳞 胶原 蛋白 规模化 制备 方法 | ||
1.一种鱼鳞I型胶原蛋白肽的制备方法,其特征在于,为以下步骤:
(1)预处理
将鱼鳞投入反应釜中,加入鱼鳞重量2-10倍的碱溶液,搅拌1-12小时,除掉鱼鳞的脂肪和其他杂质,用水洗净,加入鱼鳞重量2-10倍的酸溶液,搅拌1-12小时,再用去离子水洗净,其中碱溶液的质量体积浓度为1-4%,酸溶液的质量体积浓度为3-8%;
(2)酶解提取
利用木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、风味蛋白酶、糜蛋白酶和胰蛋白酶中的任意一种定向酶解鱼鳞I型胶原蛋白肽;将经过预处理并洗净的鱼鳞置于反应釜中,加去离子水,加入浓碱液调节pH值6~8之间,加入鱼鳞投料重量1%~5%的蛋白酶,反应温度为45~65℃,反应2~8小时;酶解结束后升温至70~80℃,保温20~30分钟灭酶,得到鱼鳞I型胶原蛋白肽酶解液;
(3)分离纯化
离心分离协同膜分离方法技术纯化鱼鳞I型胶原蛋白肽酶解液:鱼鳞I型胶原蛋白肽酶解液高速离心,所得清液用相对分子质量为10kD~5kD的纳滤膜去除大分子杂质,再用相对分子质量为1kD~200DA的纳滤膜去除小分子杂质和无机盐,并浓缩得到纯度≥95%、分子量在1000道尔顿以下的鱼鳞I型胶原蛋白肽溶液;
(4)快速干燥
利用喷雾干燥快速干燥蛋白肽溶液,得到鱼鳞I型胶原蛋白肽粉成品。
2.根据权利要求1所述鱼鳞I型胶原蛋白肽的制备方法,其特征在于:所述步骤(1)原料预处理所使用的鱼鳞为海洋鱼类鱼鳞或淡水鱼类鱼鳞。
3.根据权利要求1所述鱼鳞I型胶原蛋白肽的制备方法,其特征在于:所述步骤(1)预处理和所述步骤(2)加入浓碱液调节pH值所使用的碱为碳酸氢钠、碳酸氢钾、氢氧化钠或氢氧化钾;酸为盐酸或硝酸。
4.根据权利要求1所述鱼鳞I型胶原蛋白肽的制备方法,其特征在于:所述步骤(2)中加水量为鱼鳞重量的10倍。
5.根据权利要求1所述鱼鳞I型胶原蛋白肽的制备方法,其特征在于:所述步骤(3)中所使用的相对分子质量为10kD~5kD的纳滤膜流速为5~14立方米/小时,膜压力为0.552-0.931Mpa,温度为20~50℃;所使用的相对分子质量为1kD~200DA的纳滤膜流速为5~14立方米/小时,膜压力为0.483~2.758Mpa,温度为20~50℃。
6.根据权利要求1所述鱼鳞I型胶原蛋白肽的制备方法,其特征在于:所述步骤(3)中所使用的离心机为10000~15000rpm的连续流离心机。
7.根据权利要求1所述鱼鳞I型胶原蛋白肽的制备方法,其特征在于:所述步骤(4)中所使用的喷雾干燥的进风温度为120~180℃、出风温度为70~90℃。
8.根据权利要求1~7任一项所述鱼鳞I型胶原蛋白肽的制备方法,其特征在于:所述预处理步骤前,先对鱼鳞进行清洗以除去颗粒杂质。
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