[发明专利]一种用于检测肉制品中残留镇定剂类药物的方法

说明书

【技术领域】

本发明涉及检测肉制品中残留药物的方法，尤其是一种用于检测肉制品中残留镇定剂类药物的方法。

【背景技术】

镇静剂类药物（Sedatives）是指能缓和激动，对中枢神经系统有抑制作用，起到减轻或消除动物狂躁不安，恢复安静的一类药物。常用的药物有：苯二氮草类的地西泮、硝西泮、奥沙西泮，吩噻嗪类的氯丙嗪、异丙嗪、奋乃静，以及安乃近、苯巴比妥等。该类药物除具有镇静作用外，很多还是一类生长促进剂，被用于动物饲料添加剂，当猪等动物吃了添加上述镇定剂的饲料时，使其嗜睡少动、促进其快生长，且可其改变肉质。这些药物可对人体中枢神经系统造成不良反应，我国及许多其他国家已将此类药物列为禁用药物。但是近年来一些商贩在畜禽饲养及运输过程中擅自非法使用镇静剂类药物，导致畜禽产品中该类药物的残留，造成畜禽产品存在安全隐患，严重威胁人们的身体健康。

常见用于检测肉制品所残留镇静剂类药物的方法主要有：酶联免疫吸附法（ELISA）、高效液相色谱法（HPLC）、液相色谱-质谱法（LC-MS）、气相色谱-质谱法（GC-MS）等，目前在镇定剂类药物残留检测方面用得最多的是LC-MS，该检测方法被农业部等部门定为标准方法使用，食品方面所涉及的检测样本主要为猪肉和猪肾。但由于LC-MS所涉及的设备昂贵，目前该方法还无法在大部分检测实验室普及使用。

本发明即针对现有技术的不足而研究提出。

【发明内容】

本发明要解决的技术问题是提供一种用于检测肉制品中残留镇定剂类药物的方法，该方法通过C₁₈固相萃取柱萃取后，用气相色谱-质谱法（GC-MS）进行检测，可快速准确地测定肉制品中所残留镇静剂类药物的种类及含量，包括有地西泮、奥沙西泮、艾司唑仑、阿普唑仑、三唑仑、苯巴比妥和异丙嗪7种镇静剂类药物。

为解决上述技术问题，本发明一种用于检测肉制品中残留镇定剂类药物的方法，采用如下技术方案：

本发明一种用于检测肉制品中残留镇定剂类药物的方法，包括步骤如下：

1）样品提取：

A、称取一定量肉制品样品放入具塞离心管中，加入无水硫酸钠和提取溶剂,加入无水硫酸钠的重量为0.4～0.6倍肉制品样品的重量，加入的提取溶剂与肉制品样品V/W为5～7；

B、将A步骤所得的混合物在振荡器上进行振荡，得到混合物；

C、在B步骤中加入与所得混合物V/W为0.5的氨水-乙腈溶液，在涡旋混合器中混匀；

D、将C步骤所得混合物在离心机进行离心处理，得到上层清液和剩余残留物；

E、提取D步骤所得的上层清液；

F、将向D步骤所得剩余残留物加入与肉制品样品V/W为3～5的乙酸-乙腈溶液，在涡旋混合器中涡旋混匀，得到上层清夜；

G、提取F步骤所得的上层清夜，并与E步骤提取的上层清液合并；

H、将G步骤所得上层清液在蒸馏瓶中加热蒸发至干，得到残留物；

I、将H步骤所得残留物加入K₂HPO₄缓冲溶液，充分溶解，得到检测样品溶液；

2）样品净化：

J、依次用甲醇和蒸馏水将C₁₈固相萃取柱活化；

K、将I步骤所得检测样品溶液上样至C₁₈固相萃取柱；

L、将步骤K的C₁₈固相萃取柱用洗脱溶剂洗脱，并收集洗脱液于离心试管中；

M、将L步骤所收集的洗脱液用气体吹干，得到残留物；

N、将M步骤所得残留物用甲醇定容，得到样品净化溶液；

3）样品检测分析：

O、将N步骤所得样品净化溶液移入进样瓶，用气质联用仪（GC-MS）进行分析，得出检侧数据。

所述步骤A中提取溶剂为乙腈、氨水-乙腈和乙酸-乙腈，所述步骤L中洗脱溶剂为甲醇-丙酮溶液。

所述甲醇-丙酮溶液为甲醇、丙酮按1:1的体积比配制。

所述步骤B中振荡时间为1h，所述步骤C中涡旋混合器涡旋混匀为1min，所述D步骤中离心在4℃条件下进行，所述离心机的转数为8000r/min，离心时间为5min。

所述C步骤中氨水-乙腈溶液为氨水、乙腈按体积比1:99配制，所述F步骤中乙酸-乙腈溶液为乙酸、乙腈按体积比1:99配制。

所述I步骤K₂HPO₄缓冲溶液的pH=7.0。