[发明专利]一种羧甲基赖氨酸的检测方法及应用

权利要求书

1.一种羧甲基赖氨酸(CML)的检测方法，其特征在于包括如下步骤：

称取一定质量的待测样品，任选的包括样品粉碎的步骤；

样品在硼酸钠缓冲溶液中经硼氢化钠还原；然后用体积比为1-3：1三氯甲烷去除脂肪并沉淀蛋白质；沉淀物经盐酸水解后，添加一定量的氘代羧甲基赖氨酸(D4-CML)，过MCX阳离子交换小柱萃取净化；萃取液经氮吹浓缩后重新溶解在一定体积的体积比为3-5：1甲醇-水溶液中，得到待测液；

待测液在HILIC色谱柱中以含1-3mM乙酸铵和0.05-015％甲酸的甲醇(A)-水(B)为流动相进行梯度洗脱，D4-CML和CML通过洗脱与样品基质分离；梯度洗脱参数为0～3min，80％～50％A；3～6min，50％A；6.1min，80％A；6.1～12min，80％A；

选用电喷雾离子源(ESI)，正离子扫描，多反应监测模式(MRM)，进行对所分离的洗脱样品进行串联质谱分析，测定质谱图中CML特征峰与相对应的D4-CML的特征峰的高度之比，通过高度之比和所加入的D4-CML的量计算待测样品中CML的浓度。

2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于待测样品为奶粉、油条或薯条。

3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于所述的流动相为含2mM乙酸铵和0.1％甲酸溶液的甲醇-水混合溶液，D4-CML和CML的吸收峰位于3.2-3.6min。

4.权利要求1-3任意一项所述的检测方法的应用，其特征在于，是用以检测食品中的羧甲基赖氨酸含量。