[发明专利]血清中甘油三酯的循环酶测定方法

权利要求书

1.一种血清中甘油三酯的循环酶测定方法，其特征在于循环酶及底物同在试剂I中，试剂II仅含有脂蛋白脂肪酶有效成分；其测定方法为：血清先与试剂I于37℃温浴3～5分钟，血清中游离甘油与试剂I进行循环反应生成醌亚胺，加入试剂II后于37℃温浴4～7分钟，甘油三酯水解后产生甘油再经循环反应生成醌亚胺；反应达到一定时间后，仪器在500～520nm波长处检测，以试剂I反应产生的醌亚胺为空白，由试剂II反应产生的醌亚胺计算出甘油三酯的含量，计算公式为：

OD_TG＝OD₂-OD₁×[(SV+R₁V₁)/(SV+R₁V₁+R₂V₂)]

甘油三酯浓度＝F×OD_TG

其中OD_TG是甘油三酯产生的吸光度，OD₁是样品加入试剂I反应后测得的吸光度，OD₂是样品加入试剂II反应后测得的吸光度，SV是血清的体积，R₁V₁是试剂I的体积，R₂V₂是试剂II的体积，F是校正因数。

2.根据权利要求1所述的血清中甘油三酯的循环酶测定方法，其特征在于第一步和第二步反应均采用循环酶法测定甘油，生成红色醌亚胺进行测定。

3.根据权利要求1所述的血清中甘油三酯的循环酶测定方法，其特征在于试剂I每升Tris-HCl缓冲液内含Tris100mmol～300mmol、2，4-二氯酚1.0mmol～3.0mmol、MgSO₄9.0mmol～15.0mmol、胆酸钠3.0mmol～5.0mmol、三磷酸腺苷1.5mmol～2.5mmol、甘油激酶100U～160U、磷酸甘油氧化酶1200U～2000U、过氧化物酶1000U～1400U、4-氨基安替比林1.5mmol～2.5mmol、甘油-3-磷酸脱氢酶1200U～2000U、NADH0.8mmol～1.2mmol、Proclin-300防腐剂100μl～300μl；试剂II每升Tris-HCl缓冲液内含Tris100mmol～300mmol、脂蛋白脂肪酶1800U～2100U、Triton X-1000.08g～0.16g、Proclin-300防腐剂100μl～300μl。

4.根据权利要求3所述的血清中甘油三酯的循环酶测定方法，其特征在于试剂I和试剂II中Tris-HCl缓冲液的pH值为7.6±0.2。

5.根据权利要求3所述的血清中甘油三酯的循环酶测定方法，其特征在于测定的体积比为：样品∶试剂I∶试剂II＝3∶300～500∶30～70。