[发明专利]一种结晶紫中性红胆盐琼脂及其应用

说明书

技术领域    

    本发明为微生物领域，特别涉及一种结晶紫中性红胆盐琼脂及其应用。

背景技术    

世界上微生物间的多样化和变异性及物种生境的生态复杂性，带来了探讨、了解微生物的广泛性、复杂性和长久性。微生物的一个物种就是一个独特的基因库，微生物的新陈代谢是错综复杂的生命活动，在长期的生物进化中，形成了一套完整统一的灵敏调节系统，依靠这种调节系统，严格控制各种代谢活动。有条不紊协调进行并灵活适应环境。不同培养基，因培养基配方不同，影响其生长和变异情况。

培养基（Medium）是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料，一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐（包括微量元素）以及维生素和水等。有的培养基还含有抗菌素和色素，用于单种微生物培养和鉴定。培养基由于配制的原料不同，使用要求不同，而贮存保管方面也稍有不同。一般培养基在受热、吸潮后，易被细菌污染或分解变质，因此一般培养基必须防潮、避光、阴凉处保存。对一些需严格灭菌的培养基（如组织培养基），较长时间的贮存，必须放在3~6℃的冰箱内。由于液体培养基不易长期保管，现在均改制成粉末。

培养基根据化学分类为天然培养基、组合培养基和半组合培养基；根据物理分类为液体培养基、固定培养基和脱水培养基；根据微生物分类为选择性培养基、鉴别培养基。

发明内容

     本发明克服现有技术中的不足，提供一种结晶紫中性红胆盐琼脂及其应用。

     本发明运用生物化学，微生物学及无机、有机、分析化学和荧光技术的原理，对不同的碳源、氮源、无机盐类、维生素、生长促进剂等诸类营养组分的组合进行筛选，对培养基的pH值、离子强度、氧化-还原电势、表面张力、气体环境等物化因子进行了比较，研究出了本发明的培养基。

     本发明所采用的技术方案为：

    一种结晶紫中性红胆盐琼脂，所述培养基的组分包括EC肉汤、3.0g/L酵母粉、0.002g/L结晶紫、0.03g/L中性红、15.0 g/L琼脂、3.0g/L磷酸氢二钾、 pH值为7.3-7.5；

    在以上方案的基础上所述EC肉汤为每升EC肉汤中含有胰蛋白胨20.0g 、乳糖5.0g、磷酸二氢钾2.0g、氯化钠5.0g、三号胆盐1.5g、磷酸氢二钾4.0g，其余为蒸馏水。

    本发明还公开了所述的结晶紫中性红胆盐琼脂，用于大肠菌群的固体平板检测。

    称取本品 41.5g，加热溶解于1000ml 蒸馏水中，煮沸不要超过2 分钟。取适宜稀释度样品液1ml，加入到无菌平皿中心，将冷至  45 ± 0.5℃ 的 VRBA10-15ml倾注于平皿中。小心旋转平皿将培养基与样液充分混匀。凝固后，再加 3-4mlVRBA 覆盖平板表层，翻转平板，置于 36 ± 1℃培养 18-24 小时。无需高压灭菌。临用时制备，不得超过 3 小时。

      本发明的有益效果：

      1、培养基组方简单，制备操作方便，成本低，利于推广应用；

      2、菌生长迅速，变异率低；

      3、便于观察，分析。

具体实施方式   

实施例1：

    一种结晶紫中性红胆盐琼脂，所述培养基的组分包括EC肉汤、3.0g/L酵母粉、0.002g/L结晶紫、0.03g/L中性红、15.0 g/L琼脂、3.0g/L磷酸氢二钾、 pH值为7.3-7.5；

    在以上方案的基础上所述EC肉汤为每升EC肉汤中含有胰蛋白胨20.0g 、乳糖5.0g、磷酸二氢钾2.0g、氯化钠5.0g、三号胆盐1.5g、磷酸氢二钾4.0g，其余为蒸馏水。

    本发明还公开了所述的结晶紫中性红胆盐琼脂，用于大肠菌群的固体平板检测。

    称取本品 41.5g，加热溶解于1000ml 蒸馏水中，煮沸不要超过2 分钟。取适宜稀释度样品液1ml，加入到无菌平皿中心，将冷至  45 ± 0.5℃ 的 VRBA10-15ml倾注于平皿中。小心旋转平皿将培养基与样液充分混匀。凝固后，再加 3-4mlVRBA 覆盖平板表层，翻转平板，置于 36 ± 1℃培养 18-24 小时。无需高压灭菌。临用时制备，不得超过 3 小时。

 

在36±1℃培养18-24小时

质控菌株生长情况其它特征金黄色葡萄球菌- /大肠埃希氏菌+++紫红色菌落,周围有红色沉淀环阴沟肠杆菌+++紫红色菌落，周围有红色沉淀环沙门氏菌+++菌落无色透明