[发明专利]亚临界流体萃取胡芦巴中土大黄苷和丹叶大黄素的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种亚临界流体萃取胡芦巴中土大黄苷和丹叶大黄素的方法。

背景技术

胡芦巴(Trigonella foenum-graecum L.)为豆科胡芦巴属一年生草本植物，是一种集药用、食用、香料和饲料等价值于一身的经济作物。《本草纲目》记载，其成熟干燥的种子（又称胡芦巴）具有治疗“小肠气痛，肾脏虚冷”等疾病；2000年版《中华人民共和国药典》规定，干燥的胡芦巴种子有“温肾，驱寒，止痛”的功效，主治“肾脏虚冷，小腹冷痛，小肠疝气，寒湿脚气”等症。近年来，研究发现胡芦巴种子具有明显的的降血糖、降血脂和保肝护肝等药理作用。

芪类化合物及其衍生物（如土大黄苷和丹叶大黄素等）主要是由植物在真菌感染，强紫外线照射等不利条件下产生的一种植物抗毒素。作为胡芦巴中新发现的重要的活性成分之一，胡芦巴中芪类成分（包括土大黄苷和丹叶大黄素）因具有显著的抗菌消炎，活血化瘀和调节血糖等功效而逐渐成为研究的热点。为有效开发利用胡芦巴资源，以及进一步研究芪类化合物的药理活性及机制，提高芪类化合物的提取率，研究胡芦巴芪类成分的高效制备方法具有重要的意义。

现有芪类化合物的提取方法主要有乙醇回流提取法，有机溶剂萃取法等，这些方法存在提取过程繁琐，提取效率低，试剂耗费量大；制得的产品纯度不高等缺陷。

发明内容

本发明的目的是提供一种亚临界流体萃取胡芦巴中土大黄苷和丹叶大黄素的方法。

本发明提供的萃取胡芦巴中土大黄苷和丹叶大黄素的方法，包括如下步骤：

将胡芦巴种子粉碎后加水进行亚临界萃取，收集上层萃取液，离心，收集上清液，浓缩，完成所述土大黄苷和丹叶大黄素的萃取。

上述方法的所述粉碎步骤中，筛孔的目数为40-60目，具体为50目、40-50目或50-60目。

粉碎后的所述胡芦巴种子与水的用量比为1g：15-25mL，具体为1g：20mL、1g：20-25mL或1g：15-20mL。

所述亚临界萃取步骤中，温度100-200℃，具体为120℃、150℃、180℃、120-180℃、120-150℃或150-180℃；

压力2-6MPa，具体为2、4、5、6、2-5、2-4、4-6或4-5MPa；

时间为20-60min，具体为20、40、60、20-40或40-60min；

萃取的次数为1-3次，具体为2次、1-2次或2-3次。

所述离心步骤中，转速为2500-5000rpm，具体为2500、3000、3500、4000、4500、2500-4500或3000-4000rpm。

所述浓缩步骤中，浓缩温度为40-80℃，具体为40℃、50℃、60℃、70℃、80℃、40-70℃或50-80℃。

本发明采用亚临界流体技术萃取胡芦巴种子中两种芪类成分，与传统提取技术相比较，不但有效缩短了提取时间，而且简化了提取工艺，消除了提取过程中有机溶剂的污染。同时，在适宜的压力下，随着温度的升高，水的极性、表面张力和黏度都急剧下降，对胡芦巴种子中两种芪类化合物的溶解能力增加，从而提高了两种芪类成分的提取率，萃取物中土大黄苷的含量为30.42%-39.06%，丹叶大黄素含量为34.78%-53.15%。本发明简单快速，无污染，成本低，适合工业化生产。

附图说明

图1为标准品(A)的高效液相色谱（HPLC）图；1.土大黄苷（13.1min），2.丹叶大黄素（23.8min）；

图2为实施例1所得胡芦巴种子亚临界萃取液的HPLC图；1.土大黄苷（13.1min），2.丹叶大黄素（23.8min）。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明作进一步阐述，但本发明并不限于以下实施例。所述方法如无特别说明均为常规方法。所述原材料如无特别说明均能从公开商业途径而得。

下述实施例中均采用HPLC法，以标准品为对照，对亚临界流体萃取液中两种芪类成分进行确认以及对两种成分的总得率进行定量，其色谱条件为：Eclipse XDB C18柱(250mm×4.6mm，i.d.5μm)；

流动相：甲醇-水溶液；

梯度洗脱程序具体如下：

0分钟起至10分钟止，流动相为甲醇的质量百分含量为30-40%的甲醇水溶液；

11分钟起至25分钟止，流动相为甲醇的质量百分含量为40-50%的甲醇水溶液；