[发明专利]昆虫病毒多角体实现外源蛋白高效包裹的方法

权利要求书

1.昆虫病毒多角体实现外源蛋白高效包裹的方法，其特征是：将家蚕质型多角体病毒（BmCPV）的多角体基因（polyhedrin）以及目的蛋白基因分别构建至pFastBac Dual载体上的PH和P10启动子下面，通过重组获得同时表达多角体和目的蛋白的杆状病毒。

2.根据权利要求1所述的昆虫病毒多角体实现外源蛋白高效包裹的方法，其特征是：在目的蛋白基因前面加入81-90bp H1定位信号序列以及6-12个GGS（甘氨酸-甘氨酸-丝氨酸）柔性连接肽。

3.根据权利要求2所述的昆虫病毒多角体实现外源蛋白高效包裹的方法，其特征是：所述方法通过构建的重组杆状病毒在昆虫细胞sf9或甜菜夜蛾上实现目的蛋白的包装过程。

4.根据权利要求1、2或3所述的昆虫病毒多角体实现外源蛋白高效包裹的方法，其特征是：

由H1信号肽与柔性连接肽构成的引导基因的序列为SEQ ID NO2所述。

5.根据权利要求4所述的昆虫病毒多角体实现外源蛋白高效包裹的方法，其特征是：

H1(信号肽)+Flexible peptide(柔性链接肽)+eGFP的序列为SEQ ID NO4所述。

6.根据权利要求4所述的昆虫病毒多角体实现外源蛋白高效包裹的方法，其特征是：重组质粒为Bacmid-polyhedrin-eGFP。

7.利用如权利要求1～6任一所述方法制备而得的病毒，其特征是：所述病毒直接感染sf9或sf21细胞，在细胞内直接产生多角体包裹型的目的蛋白，每个细胞内含10-50个多角体，直径在1-2μm，并且病毒液能继续用于感染细胞或注射甜菜夜蛾。

8.根据权利要求7所述的病毒，其特征是：该病毒直接可以注射4-5龄甜菜夜蛾，3-5天后甜菜夜蛾发生液化，每头幼虫可以产生1-2亿个多角体包裹的目的蛋白，直径在1-2μm。

9.根据权利要求8所述的病毒，其特征是：所述的目的蛋白为多角体包裹型，具有生物学功能，并且为单基因编码的蛋白质。