[发明专利]一种芽孢杆菌FH3菌株及其筛选方法和应用

权利要求书

1.一种芽孢杆菌FH3菌株，其特征在于：保藏号CGMCC NO.8269。

2.如权利要求1所述的芽孢杆菌FH3菌株的筛选方法，其步骤包括：

（1）将腐烂的浒苔藻体的悬液加入到选择培养基中，摇床培养2-3天；

（2）将步骤（1）中的选择培养液经梯度稀释后的菌悬液，涂布在鉴别培养基上，待菌落长出；

（3）在长出菌落的平板上用刚果红染色法筛选有透明圈的菌株，并用平板划线分离法分离、提纯。

3.根据权利要求2所述的芽孢杆菌FH3菌株的筛选方法，其特征在于：所述步骤（1）中，腐烂的浒苔藻体的悬液与选择培养基的体积比为1:25-45；摇床培养的温度为25-35℃，转速为135-145r/min。

4.根据权利要求2或3所述的芽孢杆菌FH3菌株的筛选方法，其特征在于：所述步骤（1）中，选择培养基中的组分包括纤维素粉、硝酸钠、氯化钾、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、硫酸镁、酵母膏、水解酪素及陈海水，各组分的加入配比依次为3-5g：1g：0.3-0.5g：1.1-1.3g：0.8-1g：0.4-0.5g：0.4-0.5g：0.4-0.5g：950-1050mL。

5.根据权利要求2所述的芽孢杆菌FH3菌株的筛选方法，其特征在于：所述步骤（2）中，鉴别培养基中的组分包括羧甲基纤维素钠、酵母膏、磷酸二氢钾、琼脂、土豆汁及陈海水，各组分的加入配比依次为5-10g：1g：0.1-0.3g：12-16g：90-110mL：950-1050mL。

6.如权利要求1所述的芽孢杆菌FH3菌株酶解浒苔的应用方法：

（a）将芽孢杆菌FH3菌株于LB液体培养基中振荡培养22-26小时，然后在菌液中加入冻存缓冲液，于-20℃—-25℃保存；

（b）将步骤（a）中的芽孢杆菌FH3菌株于LB斜面培养基中斜面活化培养，然后挑取一满环于LB液体培养基中，振荡培养24-28h后取1-2mL菌液于已灭菌纤维素液体发酵培养基中，振荡培养5-7天；将发酵液低温离心，取上清液为粗酶液或是将发酵液过滤，取滤液为粗酶液；

（c）将干净的浒苔干燥、粉碎，然后与步骤（b）中的粗酶液于45-55℃条件下反应45-50小时。

7.根据权利要求1所述的芽孢杆菌FH3菌株酶解浒苔的应用方法，其特征在于：所述步骤（a）中，振荡培养的温度为25-35℃，转速为135-145r/min；所述缓冲液是体积浓度为45-55%的甘油，缓冲液与菌液的体积比为1：1-1.5。

8.根据权利要求1所述的芽孢杆菌FH3菌株酶解浒苔的应用方法，其特征在于：所述步骤（b）中，振荡培养的温度为30-35℃，转速为135-145r/min；离心分离温度为3-5℃，离心转速为3500-4500r/min，离心时间为10-20分钟。

9.根据权利要求1所述的芽孢杆菌FH3菌株酶解浒苔的应用方法，其特征在于：所述步骤（b）中，纤维素液体发酵培养基中的组分包括酵母浸膏、蛋白胨、羧甲基纤维素钠及陈海水，各组分的加入配比依次为1g：3-6g：8-12g：950-1050mL。

10.根据权利要求1所述的芽孢杆菌FH3菌株酶解浒苔的应用方法，其特征在于：所述步骤（c）中，将干净的浒苔于55-65℃下干燥10-14小时，然后粉碎至60-100目；浒苔与粗酶液的加入量比为1g：45-55mL。