[发明专利]一种基于分子辅助选择的青胫隐性白羽鸡品系的培育方法

说明书

技术领域

本发明具体涉及一种基于分子辅助选择的青胫隐性白羽鸡品系的培育方法，属于分子育种技术领域。

背景技术

随着生活水平的提高，人们的消费观念从过去的数量型转变为质量型。人们对鸡肉肉质的要求也越来越高。我国的地方鸡具有肉质好的特点，但是其生长速度较慢，饲料转化率低。而国外的快大型肉鸡虽生长速度快、饲料转化率高，其肉质较差。为解决这一问题，将国外快大型肉鸡与国内地方优质肉鸡进行杂交，既能够改善国外快大型肉鸡的肉质也能加快地方优质肉鸡的生长速度和生产性能。但是，由于我国人民长期的饮食习惯的影响，中国消费者偏爱黄麻羽、黑羽等有色羽的鸡，尤其是南方城市不接受快速生长的白羽鸡。为了使杂交后鸡的表型符合中国消费者的需求，就需要纯合的隐性白羽鸡，隐性白羽鸡生产性能高，且与我国有色羽杂交后能保持有色羽的羽色，对于我国优质鸡的育种上具有重大的意义。

发明内容

本发明的目的是提供一种基于分子辅助选择的青胫隐性白羽鸡品系的培育方法。

为了实现以上目的，本发明所采用的技术方案是：

一种基于分子辅助选择的青胫隐性白羽鸡品系的培育方法，包括以下步骤：

（1）利用青胫隐性白羽鸡作为父本，白来航鸡作为母本进行杂交，生产出F1代；

（2）F1代自交得到F2代，选留F2代青胫白羽公母鸡；

（3）利用人工引入PvuII的RFLP-PCR方法测定F2代青胫白羽公母鸡的基因型，选留显性白羽位点为ii基因型的个体，淘汰显性白羽位点为II和Ii基因型的个体，得到显性白羽位点为ii基因型的青胫白羽公母鸡；

（4）取显性白羽位点为ii基因型的青胫白羽公母鸡自交，利用步骤（3）的方法测定自交后代的基因型，重复上述步骤至稳定遗传，得到显性白羽位点为ii基因型的青胫隐性白羽鸡品系。

所述步骤（1）中青胫隐性白羽鸡为青胫黄麻羽地方鸡突变后的青胫白羽鸡，经人工引入PvuII的RFLP-PCR方法测定显性白羽位点为ii基因型。

所述步骤（3）中利用人工引入PvuII的RFLP-PCR方法，包括以下步骤：以包含PMEL17基因的待测鸡全基因组DNA为模板，以引物对P为引物PCR扩增PMEL17基因第十外显子，得到扩增片段；对扩增片段进行PvuⅡ酶切，对酶切产物进行琼脂糖凝胶电泳，根据琼脂糖凝胶电泳结果鉴定鸡显性白羽位点的基因型；

所述的引物对P为：

上游引物P-F：5’-AGTGGCACCACGCTCACCGTGGGGCAGCT-3’（如SEQ ID No.1所示），

下游引物P-R：5’-GAGGGGGTGAGTGCTGTGTTCTC-3’（如SEQ ID No.2所示）。

所述的鸡全基因组DNA采用苯酚-氯仿粗提法或蛋白酶K法提取。

所述的PCR扩增反应体系为：2×Taq PCR MasterMix 6.25μL，ddH₂O 4.25μL，P-F 0.5μL，P-R 0.5μL，DNA模板1.0μL。

所述的2×Taq PCR MasterMix含有Taq DNA聚合酶、dNTPs、氯化镁和PCR反应缓冲液，为市售商品，可购自上海生工、大连宝生物、北京百泰克、北京康为等公司。

所述的PCR扩增反应程序为：95℃预变性5min；95℃变性30s，60℃退火30s，72℃延伸20s，30个循环；72℃延伸10min；4℃保存。

所述的PvuⅡ酶切反应体系为：扩增片段10μL，Buffer 1.5μL，PvuⅡ 0.3μL，ddH₂O 3.2μL。

所述的PvuⅡ酶切反应条件为：37℃，酶切过夜。

所述的琼脂糖凝胶的质量浓度为2%。

所述的琼脂糖凝胶电泳的电压为120V，电泳时间为60min。

所述的鉴定鸡显性白羽位点基因型的方法为：II基因型表现为160bp条带；Ii基因型表现为124bp和160bp条带；ii基因型表现为124bp。

优选的，将步骤（4）得到的显性白羽位点为ii基因型的青胫隐性白羽鸡品系与青胫黄麻羽鸡品种杂交配套，生产出有色羽肉鸡。

所述的青胫黄麻羽鸡品种为固始鸡、边鸡、淮北麻鸡、淮南麻黄鸡、五华鸡、崇仁麻鸡、琅琊鸡、卢氏鸡、桃源鸡、瑶鸡、茶花鸡等。

本发明的有益效果：