[发明专利]一种油肠中肝素钠的提取工艺

说明书

技术领域

本发明涉及肝素钠的提取方法，具体涉及一种油肠中肝素钠的提取工艺。

背景技术

肝素钠存在于动物的心、肝、脾、肺、胸腺、肌肉、血管等，但主要来源于动物富含肥大细胞的组织，如肝、肺、内肠等，以O-连接形式与核心蛋白（core protein，CP）形成肝素蛋白聚糖（heparin proteoglycan, Hep-PG）。肝素可以和百余种蛋白如LDL、VLDL、LPL、SOD、AT Ш、IgG等相互作用，呈现出降血脂、抗动脉粥样硬化、免疫调节、抗炎、抗肿瘤、抗单纯孢疹病毒、抗凝血等生物活性。肝素于1920年就开始其大规模制备研究，并于1935年应用于临床，是目前世界上产量和销售量最大的来自天然的糖类药物，目前还没有任何一种药物可以替代它，且尚不能人工合成。

我国是肝素钠生产和肠衣加工大国，国内致力于从肠粘膜中提取肝素的厂家主要用盐解法和酶解法，随着肝素厂家的规模不断扩大和生产效率的逐渐提高，国内屠宰场的小肠显示出供不应求的趋势，很多肝素钠生产厂家需要进口小肠原料，但是国内屠宰场提供的小肠人工处理过，几乎不含油脂，而从国外进口的小肠，由于屠宰场没有进行有效处理，小肠外面含有大量的油脂，业界称为“油肠”，这种油肠如果用相同的生产工艺，其产率只能达到国产小肠的80%，并且损害设备、污染树脂。

发明内容

为了解决上述发明问题，本发明提出一种油肠中肝素钠的提取工艺，其产率高、效价高、成本低并且减少设备损害和树脂污染。

为了达到上述发明目的，本发明提出了以下技术方案：

    一种油肠中肝素钠的提取工艺，将刮制的带有肠皮和油脂的肠粘膜用匀浆机匀碎后，对肠粘膜进行水解后吸附，将吸附后的树脂脱附，收集脱附液进行醇沉、脱水后置于真空干燥箱中烘干即得纯品肝素钠；具体工艺步骤如下：

   （1）油肠粘膜的水解：将100份刮制的带有肠皮和油脂的肠粘膜用匀浆机匀碎后，加入带有搅拌装置、温度和pH显示、进出料装置以及观察器的反应釜中，加肝素钠专用NaCL 4-7份，调碱度至pH为8.0-9.0，加酶制剂0.001-0.005份，升温至40-50 ℃，保温1-2 h后调pH至9.5-10，升温至55-65 ℃，保温1-2 h，升温至95 ℃，离心，将水解液泵入吸附罐中吸附；

    （2）吸附：在带有搅拌装置、温度显示、进出料装置的反应釜中加入100 份由（1）得的水解液，加入罗门哈斯AMBERLITE FPA 98 CL树脂2-4 份，调至温度65-70 ℃，pH为7.5-8.0，搅拌吸附7-10 h，将树脂滤出，清水洗净；

（3）脱附：将步骤（2）回收的树脂，用60-65 ℃的清水冲洗1-2 遍，然后用60-65 ℃，pH为8.5-9.0的0.4-0.7 mol/L的NaCL水溶液浸泡0.5-1 h后，排净浸泡液，加入质量为0.8-1.3倍树脂质量的2.5-4 mol/L的NaCL溶液，55- 60 ℃搅拌2-4 h，过滤收集脱附液；再添加质量为1.0-1.4 倍树脂质量的2.5-4 mol/L的 NaCL溶液，55-60 ℃搅拌 1-3 h，过滤收集脱附液；用质量为1.1-1.4 倍树脂质量的3.0-4.0 mol/L的NaCL溶液搅拌清洗后收集洗液，用于下批树脂的脱附；

（4）醇沉：将步骤（3）中第一次和第二次的脱附液合并，加入酒精度在80-95°的乙醇搅拌，使洗脱液的乙醇终浓度到40-50°，搅拌30-70 min后，静置8-10 h，将酒沉的上清液回收，并收集肝素钠沉淀；用酒精度在90-95°的乙醇脱水2-3次，收集脱水后肝素钠；

（5）干燥：将步骤（4）中脱水后的肝素钠置于真空干燥箱，60-70 ℃下干燥，10-12 h，使含水量在5 %以下，得到纯品肝素钠。

    对于步骤（1）中酶制剂为脂肪酶，温度在40-50 ℃，pH为8.0-9.0。

    对于步骤（1）中分解保温的pH调至9.5-10，温度调至55-65 ℃。

    对于步骤（2）中控制温度在65-70 ℃，pH在7.5-8.0之间，吸附7-10 h。

    对于步骤（3）中首先用60-65 ℃的清水和60-65 ℃、pH为8.5-9.0的0.4-0.7 mol/L的NaCL溶液冲洗浸泡。

对于步骤（3）中脱附液的温度是55-60 ℃，第一次脱附液的质量为0.8-1.3倍树脂质量，第二次脱附液的质量为1.0-1.4倍树脂质量，第三次脱附液的质量为1.1-1.4倍树脂质量。