[发明专利]重组融合蛋白的KEX2剪切区域

权利要求书

1.编码融合多肽的融合DNA构建体，其从所述构建体5′端起以可操控连接的方式包括：

启动子，

编码信号序列的第一DNA分子；

编码载体蛋白的第二DNA分子；

编码KEX2区域的第三DNA分子，所述区域包含KEX2位点(B₁B₂)和紧邻所述KEX2位点5’端的KEX-2位点前序列((X)_n＝2至6)；和

编码目标蛋白的第四DNA分子。

2.权利要求1所述的融合DNA构建体，其中所述KEX2区域为X₄X₃X₂X₁KR。

3.权利要求2所述的融合DNA构建体，其中：

X₄是V、S、N、L或K；

X₃是A、V、D、W、E或P；

X₂是V、I、L或F；和

X₁是E、S、T或Y。

4.权利要求3所述的融合DNA构建体，其中X₄是V。

5.权利要求3所述的融合DNA构建体，其中X₃是A。

6.权利要求3所述的融合DNA构建体，其中X₂是V。

7.权利要求3所述的融合DNA构建体，其中X₁是E或Y。

8.权利要求3所述的融合DNA构建体，其中所述KEX2位点前序列选自：VAVE(SEQ ID NO：84)、VAVY(SEQ ID NO：87)、LAVE(SEQ ID NO：88)、KAVE(SEQ ID NO：89)、VAIE(SEQ ID NO：90)、VALE(SEQ ID NO：91)、VAFE(SEQ ID NO：92)、VWVE(SEQ ID NO：93)、VEVE(SEQ ID NO：94)和VPVE(SEQ ID NO：95)。

9.权利要求1所述的融合DNA构建体，其中所述第一DNA分子和第二DNA分子编码木霉属(Trichoderma)CBH1信号序列和载体蛋白，或木霉属内切葡聚糖酶信号序列和载体蛋白。

10.权利要求1所述的融合DNA构建体，其中所述第一DNA分子和第二DNA分子编码葡糖淀粉酶信号序列和载体蛋白，或α-淀粉酶信号序列和载体蛋白。

11.权利要求1所述的融合DNA构建体，其中所述目标蛋白是酶。

12.权利要求1所述的融合DNA构建体，其中所述目标蛋白是治疗蛋白。

13.权利要求12所述的融合DNA构建体，其中所述治疗蛋白是抗体。

14.权利要求13所述的融合DNA构建体，其中所述抗体是轻链或重链单克隆抗体。

15.权利要求3所述的融合DNA构建体，其中所述第一DNA分子和第二DNA分子编码CBH1信号序列和载体蛋白，并且所述第四DNA分子编码抗体轻链或其片段。

16.权利要求3所述的融合DNA构建体，其中所述第一DNA分子和第二DNA分子编码葡糖淀粉酶信号序列和载体蛋白，并且所述第四DNA分子编码抗体轻链或其片段。

17.融合蛋白，其由权利要求1所述的融合DNA构建体编码。

18.宿主细胞，其含有权利要求1所述的融合DNA构建体。

19.权利要求18所述的宿主细胞，其中所述宿主细胞为木霉属宿主细胞。

20.权利要求19所述的宿主细胞，其中所述木霉属细胞为里氏木霉(T. ressei)细胞。

21.载体，其含有权利要求1所述的融合DNA构建体。

22.宿主细胞，其含有权利要求21所述的载体。

23.权利要求22所述的宿主细胞，其中所述宿主细胞为木霉属宿主细胞。