[发明专利]小鼠近视模型的诱导装置、诱导方法以及小鼠近视模型

说明书

技术领域

本发明涉及近视研究领域中小鼠近视模型的诱导装置、诱导方法以及小鼠近视模型。

背景技术

近视动物模型是近视研究的重要组成部分，对探讨近视发病机理和寻求防治措施起到至关重要的作用。自上世纪70年代初小鸡近视眼模型的建立，目前已有多种模式生物建立了近视模型，包括恒河猴、豚鼠、小鼠、斑马鱼等。这其中小鼠因其遗传背景清晰，且建立了一系列成熟的基因敲除及转基因模型，近10年来已成为国内外普遍采用的造模对象。

 小鼠近视的诱导方法主要有形觉剥夺法（Form deprivation myopia, FDM）和离焦镜片诱导法（Lens induced myopia, LIM）。形觉剥夺法应用比较广泛，具体操作方法又包括了眼睑缝合法、半透明膜法、塑料眼罩法、项圈+眼罩法以及头架+眼罩法；离焦镜片诱导法报道相对少，包括单纯眼罩法、项圈+眼罩法及屈光手术等。各种方法的特点简介如下：

眼睑缝合法是Tejedor, J首创的经典方法，操作简单，但易被小鼠破坏，存在感染风险，且压迫眼球可能影响其健康，有逐渐被淘汰的趋势；半透明膜法由国内复旦大学研究组设计，类似于弥散镜片，将半透明膜固定于眼周，操作简单，同样容易被小鼠破坏；塑料眼罩法温州医学院发明，将特制的塑料眼罩缝合固定于小鼠的诱导眼一侧，操作简单，但稳定性可能不高；项圈+眼罩法由Schaeffel F首创，是目前应用比较多的方法，项圈可减少小鼠对眼罩的破坏，但容易影响其进食饮水及精神状态，且限制生理性“洗脸”清洁动作；单纯眼罩法最先由Barathi V A报道，可将诱导镜片的圆形底座先固定在眼周，再将镜片固定在底座上，置于眼前，操作简单，但易被破坏；屈光手术法理论可行，尚未见相关的研究论文报道。

头架+眼罩法由Faulkner A E 首创，充分利用了颅骨与眼球位置相对固定的特点，是目前小鼠近视模型研究领域比较成功的制作方法。该制作方法需暴露小鼠局部颅骨，刮除骨膜，通过骨钉、丙烯酸树脂头座等装置将遮眼镜框置于小鼠的诱导眼前，可进行遮眼镜框的前后距离调整，并配有对侧平衡杆以稳定装置。头架+眼罩法实现了模型制作时不直接接触小鼠眼球或眼周组织，可根据不同鼠龄调整遮眼镜框位置，能方便地对眼球进行操作和测量，利于眼部健康的维护。但该方法也存在明显的缺点：1）手术操作复杂，技术难度高，对小鼠创伤大；2）诱导装置复杂且成本高，仅能在少数有条件的实验室开展；3）头顶固定装置对局部组织的影响大，脱落后再次造模的可能性小。

总之，目前小鼠近视模型的诱导方法很多，各有利弊。相对而言，项圈能够限制小鼠的搔抓，但会显著影响正常的生活习性；头顶固定最稳定，但手术复杂且技术难度高，成本也高，目前小鼠近视模型的制作尚缺乏一种既稳定、安全、经济又微创的方法。

发明内容

本发明目的在于尽可能克服目前小鼠近视诱导方法的缺点，不安装项圈限制小鼠的正常习性，吸取头顶固定稳定性高的经验，提出一种小鼠近视模型的诱导装置、诱导方法以及小鼠近视模型，相对稳定、安全、经济又微创。

一种小鼠近视模型的诱导装置，包括螺丝套件和近视头架两部分，所述的螺丝套件用于将近视头架固定在小鼠的头部。

优选地，所述的螺丝套件采用无毒、生物相容性好的尼龙平头螺丝套件，包括螺杆，螺帽及垫片。

 优选地，所述的近视头架具有可塑性，包括腰孔、连接杆、镜架及鼻托四部分，连接杆分别与腰孔、镜架、鼻托相连；腰孔呈椭圆形，用于与螺杆固定及前后距离微调，镜架设有多个镜片托用于固定镜片，鼻托用于缝合固定近视头架于鼻部。

一种小鼠近视模型的诱导方法，步骤如下：

1）小鼠麻醉后头颈部剃毛，垂直耳根连线作长1厘米的纵行皮肤切口；

2）以顶间骨与两块顶骨的交点为中心，缝合固定螺杆于周边组织，再缝合皮肤切口；

3）安装垫片，将腰孔置于垫片上，根据眼球位置调节前后距离，使眼球中心与镜架中心相对应，再用螺帽固定近视头架；

4）对鼻托进行形态微调，使之与小鼠鼻部相吻合，缝合固定鼻托；

5）利用镜片托固定镜片于镜架的一只上，并在连接杆上作标记；得到所述的小鼠近视模型。

一种利用所述的方法得到的小鼠近视模型，小鼠的诱导眼呈近视化发展，与对照眼的屈光度、眼轴长度存在显著性的统计学差异。

本发明的有益效果在于：

1） 手术创伤较头架+眼罩法小，仅涉及皮肤及肌肉缝合；

2） 装置整体不接触眼球或眼周结构，操作安全；

3） 螺丝固定的方法方便拆卸，利于日常维护及检测；