[发明专利]对腺普甲硫氨酸菌的原生质体的制备方法在审
申请号: | 201310575466.X | 申请日: | 2013-11-18 |
公开(公告)号: | CN103642697A | 公开(公告)日: | 2014-03-19 |
发明(设计)人: | 于丹 | 申请(专利权)人: | 于丹 |
主分类号: | C12N1/14 | 分类号: | C12N1/14 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 116000 辽宁省大连市西*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 甲硫氨酸 原生 质体 制备 方法 | ||
技术领域
本发明涉及一种生化实验的制备方法,具体来说,是指对腺普甲硫氨酸菌的原生质体的制备方法。
背景技术
腺苷基甲硫氨酸,是指带有一个活化了的甲基,是一种参与甲基转移反应的辅酶,存在于所有的真核细胞中。研究表明定期食用S-腺苷基蛋氨酸可抗抑郁,肝脏疾病,和关节炎/关节疼痛。在美国市场上用SAM-e的名字按营养补品销售,有改善情绪、保养肝脏和舒适关节的功效。SAM在生物体所有细胞的代谢中均起重要作用,是体内100 多种不同的甲基转移酶催化反应的甲基供体;也是合成谷胱甘肽(GSH)的转硫过程和合成多胺的转氨丙基过程的前体分子,并且还与多种酶的活性相关。来源充足的SAM是维持这些代谢途径正常运转的前提,有转甲基作用、转氨丙基作用、转硫作用。具有消炎、减轻疼痛及组织修复功能,对关节病疗效显著,具有明显促进软骨生成和减轻关节疼痛、僵硬和肿胀的功效,且与非类固醇抗炎药相比,既不抑制前列腺素合成,也不会操作胃肠道。欧洲已将SAMe作为治疗关节炎的处方药使用。
发明内容
为克服上述技术问题,我们提出了以下技术方案:
对腺普甲硫氨酸菌的原生质体的制备方法,
第一步:选取合适的菌株:将目的菌株,即腺普甲硫氨酸菌株进行活化以及单孢分离,然后选取目的数量十倍的单菌落;
第二步:离心筛选:离心后,在离心瓶中选取相对较完整的菌株,数量最少为原来的二分之一;
第三步:传代实验,然后在培养基中进行发酵培养,将传代比较稳定的挑选出来;
第四步:用一疏基乙醇进行处理,还原菌株细胞壁中的胶原蛋白,以提高其原生质体的形成率;
第五步:加入高浓度的稳渗液,然后考察期对再生和形成率的影响;
第六步:加入甘露醇后烘烤,即可。
本发明中,所述酶解时间为120-130分钟。
本发明的有益效果是,工艺简单,最终产物累积量高,而且分离提纯比较容易,分子稳定。
具体实施方式
对腺普甲硫氨酸菌的原生质体的制备方法,
第一步:选取合适的菌株:将目的菌株,即腺普甲硫氨酸菌株进行活化以及单孢分离,然后选取目的数量十倍的单菌落;
第二步:离心筛选:离心后,在离心瓶中选取相对较完整的菌株,数量最少为原来的二分之一;
第三步:传代实验,然后在培养基中进行发酵培养,将传代比较稳定的挑选出来;
第四步:用一疏基乙醇进行处理,还原菌株细胞壁中的胶原蛋白,以提高其原生质体的形成率;
第五步:加入高浓度的稳渗液,然后考察期对再生和形成率的影响;
第六步:加入甘露醇后烘烤,即可。
所述酶解时间为120分钟。
以上所述,仅为本发明较佳的具体实施方式,但本发明的保护范围并不局限于此,任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明披露的技术范围内,根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变,都应涵盖在本发明的保护范围之内。
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