[发明专利]对腺普甲硫氨酸菌的原生质体的制备方法在审

专利信息
申请号: 201310575466.X 申请日: 2013-11-18
公开(公告)号: CN103642697A 公开(公告)日: 2014-03-19
发明(设计)人: 于丹 申请(专利权)人: 于丹
主分类号: C12N1/14 分类号: C12N1/14
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 116000 辽宁省大连市西*** 国省代码: 辽宁;21
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摘要:
搜索关键词: 甲硫氨酸 原生 质体 制备 方法
【说明书】:

技术领域

发明涉及一种生化实验的制备方法,具体来说,是指对腺普甲硫氨酸菌的原生质体的制备方法。 

背景技术

腺苷基甲硫氨酸,是指带有一个活化了的甲基,是一种参与甲基转移反应的辅酶,存在于所有的真核细胞中。研究表明定期食用S-腺苷基蛋氨酸可抗抑郁,肝脏疾病,和关节炎/关节疼痛。在美国市场上用SAM-e的名字按营养补品销售,有改善情绪、保养肝脏和舒适关节的功效。SAM在生物体所有细胞的代谢中均起重要作用,是体内100 多种不同的甲基转移酶催化反应的甲基供体;也是合成谷胱甘肽(GSH)的转硫过程和合成多胺的转氨丙基过程的前体分子,并且还与多种酶的活性相关。来源充足的SAM是维持这些代谢途径正常运转的前提,有转甲基作用、转氨丙基作用、转硫作用。具有消炎、减轻疼痛及组织修复功能,对关节病疗效显著,具有明显促进软骨生成和减轻关节疼痛、僵硬和肿胀的功效,且与非类固醇抗炎药相比,既不抑制前列腺素合成,也不会操作胃肠道。欧洲已将SAMe作为治疗关节炎的处方药使用。 

发明内容

为克服上述技术问题,我们提出了以下技术方案: 

对腺普甲硫氨酸菌的原生质体的制备方法, 

第一步:选取合适的菌株:将目的菌株,即腺普甲硫氨酸菌株进行活化以及单孢分离,然后选取目的数量十倍的单菌落;

第二步:离心筛选:离心后,在离心瓶中选取相对较完整的菌株,数量最少为原来的二分之一;

第三步:传代实验,然后在培养基中进行发酵培养,将传代比较稳定的挑选出来;

第四步:用一疏基乙醇进行处理,还原菌株细胞壁中的胶原蛋白,以提高其原生质体的形成率;

第五步:加入高浓度的稳渗液,然后考察期对再生和形成率的影响;

第六步:加入甘露醇后烘烤,即可。

本发明中,所述酶解时间为120-130分钟。 

本发明的有益效果是,工艺简单,最终产物累积量高,而且分离提纯比较容易,分子稳定。 

具体实施方式

对腺普甲硫氨酸菌的原生质体的制备方法, 

第一步:选取合适的菌株:将目的菌株,即腺普甲硫氨酸菌株进行活化以及单孢分离,然后选取目的数量十倍的单菌落;

第二步:离心筛选:离心后,在离心瓶中选取相对较完整的菌株,数量最少为原来的二分之一;

第三步:传代实验,然后在培养基中进行发酵培养,将传代比较稳定的挑选出来;

第四步:用一疏基乙醇进行处理,还原菌株细胞壁中的胶原蛋白,以提高其原生质体的形成率;

第五步:加入高浓度的稳渗液,然后考察期对再生和形成率的影响;

第六步:加入甘露醇后烘烤,即可。

所述酶解时间为120分钟。 

以上所述,仅为本发明较佳的具体实施方式,但本发明的保护范围并不局限于此,任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明披露的技术范围内,根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变,都应涵盖在本发明的保护范围之内。 

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