[发明专利]一种十数樟提取物的制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明属于民族药物领域，更具体涉及一种十数樟提取物的制备方法，同时涉及一种十数樟提取物在治疗或预防口腔疾病药物中的用途。

背景技术

口腔常见疾病如龋齿、牙龈炎、牙周炎、牙龈脓肿、牙齿松动等都与口腔致病菌密切相关。口腔中一旦出现微小伤口，致病菌还可随着血液循环到达身体其它地方，引起关节炎、心内膜炎等疾病；且因其发病部位——口腔颌面部与头部各器官关系密切，一旦发病病情常较急重，控制不佳极易引起全身并发症。使用化学漱口液是预防和治疗口腔疾病的重要手段,目前临床常用的化学漱口液虽有较好的抑菌作用,但也存在口感不佳及药物不良反应,严重者甚至可引起口腔黏膜剥脱（吴飞华等，2006）。

乌干达十数樟（Warburgia ugandensis）为白桂皮目，白桂皮科，十数樟属植物，广泛分布于非洲的热带及亚热带地区。在非洲当地，W.ugandensis是一种重要的传统药物，其树皮及根常用于治疗牙痛、胃痛、肌肉痛、便秘、腹泻、疟疾、伤口溃烂等(Kokwaro et al.,2009)。已有研究表明，W.ugandensis中含有丰富的倍半萜烯类化合物，并具有显著的抗细菌、抗真菌、抗溃疡、灭螺、抗利什曼虫、昆虫拒食等活性（Opiyo et al.,2011）。目前国内尚无乌干达十数樟抑菌活性提取物的制备及其表征方法的报道。

发明内容

本发明的目的是在于提供了一种十数樟提取物的制备方法，方法易行，操作简便，以植物园引种的乌干达十数樟新鲜树皮为原料，经简单粉碎后通过溶剂超声提取，离心、除杂，浓缩和干燥等步骤，提取制备出了具有很强抑菌活性的十数樟提取物。

本发明的另一个目的是在于提供了一种十数樟提取物在治疗或预防口腔疾病药物中的应用。其优点在于无毒副作用、不刺激口腔黏膜，不产生耐药性,属于发展前景较好的口腔清洁抗菌剂。

为了实现上述的目的，本发明采用以下技术措施：

非洲特有药用植物——乌干达十数樟（Warburgia ugandensis）抗口腔致病菌活性成分的提取、分离、制备、表征及其应用。以鲜乌干达十数樟树皮为原料，在不同温度、不同溶剂和不同提取方法下对其中的抗菌活性成分进行提取，结果表明在40℃条件下，以乙醇、正己烷等为提取溶剂，料液比10：1，超声处理30min提取效果最佳。抗菌活性测试表明，按上述方法的乙醇等混合溶剂提取物活性最高，对枯草芽孢杆菌（B.subtilis）、埃希氏大肠杆菌（E.coli）和金黄色葡萄球菌（S.aureus）抑菌圈直径分别为19、14、19mm，与阳性对照庆大霉素相当;对变异链球菌(Streptococcus mutans)、放线伴生菌(Actinobacillus actinomycetemcomitans)、牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis)、白念珠菌(Canidia albicans)、粘(性)放线菌(Actinomyces viscosus)、放线菌内氏放线菌(Actinomyces naeslundii)、具核梭杆菌(Fusobacterium nucleatum)等常见口腔致病菌的MIC值为3.5-16mg/mL之间，与阳性对照甲硝唑接近。利用LC-ESI-MSn的对其提取物进行分析，结果表明主要为drimane型倍半萜类成分。乌干达十数樟树皮提取物具有良好的抑菌作用,且无毒性、不刺激口腔黏膜，不产生耐药性,属于发展前景较好的口腔清洁抗菌剂。

一种十数樟提取物的制备方法，其步骤是：

A、将冻存于-78－-82℃冰箱的新鲜乌干达十数樟树皮取出，用研磨仪粉碎至60—100目。

B、称取药材粗粉，过70-90目筛，按10倍量（m/V）体积分别加入甲醇、正己烷、乙酸乙酯、乙醇和正丁醇各200mL，38－42℃条件下超声处理28－32min，获得一种提取液。

C、将提取液10000r/min离心28－32min得上清液。每种溶剂（甲醇、正己烷、乙酸乙酯、乙醇和正丁醇等）分别重复提取2－4次，合并上清液，44－46℃旋转蒸发挥去有机溶剂得浓缩浸膏。

D、乙醇提取物经冻干或喷雾干燥，得到一种乌干达十数樟提取物。

一种乌干达十数樟提取物，它由多种drimane型倍半萜类化合物组成，其中已鉴定活性成分为一种十数樟提取物的结构式如下：

其中：O——氧；H——氢；OH——羟基；OAc——乙酰基；CHO——醛基。