[发明专利]可用于治疗银屑病的小RNA及其衍生物和药物制剂

说明书

技术领域

本发明涉及基因药物领域，特别是指可用于治疗银屑病的的小RNA及其衍生物和药物制剂。 

背景技术

银屑病，又名牛皮癣，是一种慢性感染性皮肤失调证，患病率占世界人口的1～3％。1984年我国24个省、市、自治区进行流行病学调查，其患病率为0.123％，约占皮肤科门诊的5～6％。 

患者病变皮肤处出现无传染性红色浸润斑，边界明显，其角质细胞异常增生和异常分化并导致表皮增生，同时伴有淋巴细胞渗透和表皮血管扩张、蔓延的特征。 

至今人们对银屑病发病机制的认识仍非常有限，通常认为是人体免疫细胞的复杂调控网络和炎症细胞因子相互作用的结果。易感个体在诱发因素的作用下，凋亡细胞释放的自身DNA和自身RNA与银屑病皮损中过度表达的抗菌肽LL37结合形成复合体，诱发浆细胞样树突状细胞激活，通过产生Th1型细胞因子诱导T细胞向Th1型细胞增殖分化。浆细胞样树突状细胞特异性亚型可产生TNF-α及促进一氧化氮合酶产生。活化的树突状细胞移行进入引流淋巴结，初始T细胞在IL-12和IL-23的作用下树突状细胞刺激分化成为Th1和Th17型效应细胞，经体液循环回流移行进入皮肤组织。T细胞产生大量的TNF-α、IFN-γ、IL-17等细胞因子，刺激角质形成细胞增生活化，产生一系列趋化因子和细胞因子诱导促炎症活动。其结果导致皮肤内出现大量炎症细胞的浸润，表皮角质形成细胞的过度增殖，真皮乳头微小血管的过度增生，临床上逐渐出现银屑病典型的皮疹—-鳞屑性红斑。在银屑病样皮肤病灶中表达的细胞因子主要是Th-1和Th-17免疫细胞亚型分泌的，并且主要增加促炎症反应细胞因子，如肿瘤坏死因子-α，干扰素-γ，白介素-1，白介素-2，白介素-12，白介素-17，白介素-23，以及粘合素-LFA-1。虽然这些促炎症细胞因子并不见得是银屑病的根本原因，但它们在维持银屑病皮肤病灶的炎症方面起着关键性的作 用。因此降低或抑制一个或数个促炎症细胞因子的表达是治疗银屑病的一个颇有希望的策略。 

不久前人们通过人源化抗体的技术方法，研究发现针对一个或几个促炎症因子的单克隆抗体，能够有效地治疗某些银屑病病人，其中研究比较多的是针对TNFα的单克隆抗体，其商品名有infliximab和adalimumab，这种抗体通过直接结合TNFα蛋白从而抑制TNFα效应基因，达到临床治疗银屑病的效果。IL-12/23抑制剂(乌司奴单抗)等新的高选择性生物制剂在国外也已被批准用于治疗银屑病。为此有报道研究通过小RNA干扰技术直接沉默TNFα的表达，实验研究表明对人银屑病的动物模型也具有一定的治疗作用。然而单纯的针对某一个银屑病致病细胞因子的治疗存在着停药治疗后病情反弹等副作用。因此急需选取新的，对银屑病致病细胞因子进行新靶点的新型药物的研发。 

在对小分子的药物活性筛选研究中发现针对p38MAPK通路的蛋白激酶抑制剂小分子化合物能够有效的用于银屑病的治疗，但由于其毒性大，所以这类药物除了用于某些肿瘤的治疗外，在银屑病等慢性疾病的治疗中一直没能进入二期临床。由于小分子药物的毒性有多种原因，如小分子作用靶点不专一，小分子化合物的代谢产物具有毒性等原因，选取p38 MAPK通路中的调控基因作为银屑病的基因治疗靶点仍具有可行性。近年来对银屑病病理学的研究进一步佐证了这一点。Yu XJ等和Funding AT等分别报道在银屑病人的病理组织p38的磷酸化要比正常组织中高出2倍左右，同时在该通路上的MEK，ERK1/2和CREB1的磷酸化也比正常对照组显著提高。沉默MSK1，MSK2能够抑制CREB1的表达，同时敲除MSK1还能够有效的降低和银屑病直接相关的免疫分子的表达，如IL-6，IL-8和TNFα.然而上述研究并没有阐明CREB1基因的敲除是否能够同样抑制细胞因子TNFα等的表达。 

近年发展起来的小RNA干扰技术为银屑病治疗的基因药物研发带来新的发展机会。干扰小RNA是一类长度为20个碱基的能与基因的mRNA互补，经过Dicer-Ago2复合物能使mRNA降解的一类天然或合成小RNA。小RNA药物的特点是靶点的特异性强，降解产物没有毒性，是当前新药研究的一个新的突破点。本发明就是在选择银屑病的新靶点的基础上，结合小RNA的设计 技术和小RNA的透皮传递技术，对银屑病的小鼠模型进行治疗，以发现新的高效、低毒的治疗银屑病的潜在小RNA药物。 

发明内容