[发明专利]一种快速全血血小板聚集功能检测装置及方法

说明书

技术领域

本发明涉及检验医学领域，具体涉及一种采用全血为样本的快速全血血小板聚集功能检测装置及方法。

背景技术

 血栓性疾病是指由于血液形成栓塞而引起的心梗、脑梗等多种疾病的总称。根据国际及我国卫生组织机构发布的资料，由血栓病导致的死亡率长期占据各病因死亡的首位，血栓病具有致死率高、发病率高、复发率高、致残率高等特点，已成为目前对人类健康和生命危害最为严重的疾病。

 血小板是血液中凝血与止血功能的重要成份，长期实验室研究和临床实践均证实：血小板是血栓形成中第一和关键的因素；抗血小板药物是血栓病预防和治疗的关键措施。然而近年来的研究发现，抗血小板药物对于大多数血栓病患者的治疗或预防是有益的，但是，不同个体、甚至相同个体的不同时期服用抗血小板药物的反应是不同的：部分个体有效，部分无效，同时还有部分个体发生出血（过敏）。因此，有效的血小板功能检测技术手段在血栓性疾病诊断、预防以及治疗中具有十分重要的价值。

  自上世纪Born氏发明光学比浊法血小板聚集功能检测方法以来，虽然已有多种不同原理、不同模式的血小板检测技术方法推出。但目前在医学实际工作中，血小板功能检测还主要采用光学比浊法。光学比浊法检测血小板聚集功能的原理是：抗凝血浆中的血小板对光的透射可以发生吸收或阻碍，因此，对血小板含量较高的样品光照检测时光透过率较低，而当血浆中血小板由于聚集等原因减少后，血浆的光通过率可以提高，因此该方法通过检测透射光信号强度（I）及透射光的变化对血浆中的血小板含量及聚集功能进行检测。具体检测操作流程为：1）首先将枸橼酸抗凝血样进行低速离心制备富含血小板血浆（RPP）：将抗凝血标本离心500～800转/分，离心5-10分钟，将红细胞离心沉降到样品管底部，上层分离出透明富含血小板血浆；2）制备贫血小板血浆（PPP）：将上述已制备好的部分富血小板血浆再次高速离心（3000转/分以上，离心10分钟），使得血浆中原来含有的血小板由于强力的离心而沉降到管底，上清血浆中已无血小板成为贫血小板血浆；3）.对富血小板血浆（RPP）中血小板数量调整，即对RPP中血小板数量进行检测，而后将富血小板血浆中的血小板数量调整到规定范围；4）正式检测：分别将富血小板血浆和贫血小板血浆（一般各300ul），分别加入二个相同的检测杯中恒温预热5min，而后将装贫血小板血浆检测杯放在专用光学检测仪器用透射光检测，所测值作为本底值（或称调零），而后将装有调整数量后的富血小板血浆检测杯也放到仪器上检测获得原始光信号值，随后加入诱聚剂，仪器检测记录加入诱聚剂后随着血小板聚集沉降光信号逐步增强的过程。该方法将检测贫血小板血浆获得的光强度信号值作为100%聚集值，而将富血小板血浆检测的起始光信号强度值作为0%聚集的光信号值。将富血小板血浆加入诱聚剂后的光信号强度变化记录比较，获得富血小板血浆在加入诱聚剂后血小板聚集导致光信号强度增加的幅度从而实现对样品血小板功能的检测。该方法操作环节多、耗时长，操作标准化难度大，用血量大，而由于血小板功能稳定性较差，在检测中常由于温度、震荡、时间过长等因素使血小板功能发生改变。因此该方法检测结果稳定性较差，难以在临床实践中推广普及。

  除此方法外，目前还有一些其它的血小板功能检测仪器和检测方法。如：1）PFA-100及PFA-200仪，其原理是通过检测血样在诱导剂的刺激下聚集堵塞检测微孔的时间长短判断血小板的功能；2）血栓弹力图分析法（Thrombelastography），是通过监测血样凝固的速度、强度（弹性）等指标判断血小板的功能水平；3）VerifyNow仪（全血光学检测法）是通过检测全血中血小板在诱聚剂刺激下发生聚集后，引起标本透光率的提高来获得对血小板聚集功能水平的判断；4）Plateletworks法，是采用同一患者采集二份血样，其中一份血样为EDTA 抗凝血样（血小板已不具有聚集功能）、另一管采血管中加有枸橼酸盐抗凝剂和血小板聚集诱聚剂，将二份血样分别检测其中血小板数量，通过比较来自同一个体的二份不同处理血样中血小板数量的差异来获得对血小板的聚集功能判断。此外还有：流式细胞仪检测法、全血阻抗检测法等等。这些方法都普遍存在检测结果稳定性较差，用血量较大，或是操作繁琐、耗时长、工作强度大；或检测费用昂贵等原因难以在临床普及。此外这些方法的共同不足就是无法适应大批量样本检测。由于现有检测技术的缺陷和不足正是导致目前血小板功能检测不能在医学临床普及应用，或许也是目前血栓性疾病危害严重的重要原因。

发明内容