[发明专利]一种木薯渣厌氧发酵残渣产纤维素酶及其糖化方法有效
| 申请号: | 201310563197.5 | 申请日: | 2013-11-14 |
| 公开(公告)号: | CN103642773A | 公开(公告)日: | 2014-03-19 |
| 发明(设计)人: | 何玉财;龚磊;李创;陶志成;王茜;张跃;陆婷;吴殷琦;张丹平 | 申请(专利权)人: | 常州大学 |
| 主分类号: | C12N9/42 | 分类号: | C12N9/42;C12P19/14;C12P19/02 |
| 代理公司: | 南京经纬专利商标代理有限公司 32200 | 代理人: | 楼高潮 |
| 地址: | 213164 *** | 国省代码: | 江苏;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 木薯 渣厌氧 发酵 残渣 纤维素酶 及其 糖化 方法 | ||
1.木薯渣厌氧发酵残渣为碳源生产地霉菌纤维素酶及其糖化的方法,其特征在于按照如下步骤进行:
(1) 菌株的培养及其产酶过程:
在发酵罐中装入其占其体积3/5的培养基,在30℃、搅拌速度为400 rpm和通气量为2.4 L/min条件下培养地霉菌Galactomyces sp. 3 天;获得的纤维素酶发酵液用于糖化木薯渣厌氧发酵残渣;
(2)酶解预处理木薯渣厌氧发酵残渣:
在110-130 ℃下对木薯渣厌氧发酵残渣置于1-乙基-1-甲基-咪唑-二乙基磷酸盐([Emim][DEP])-磷酸-水预处理体系中进行溶解预处理30-120 min后,加入去离子水洗涤再生得到纤维素原料;再生的纤维素材料去离子水洗涤三次后,加入乙酸-乙酸钠缓冲液(50 mM, pH 4.8)和纤维素酶发酵液形成的混合体系,其中木薯渣厌氧发酵残渣纤维素原料最终质量浓度为3%,在50 ℃和180 rpm的恒温摇床上振荡反应,即可达到酶解木薯渣厌氧发酵残渣的目的。
2.根据权利要求1所述的木薯渣厌氧发酵残渣为碳源生产地霉菌纤维素酶及其糖化的方法,其特征在于其中步骤(1)培养基组成如下:NH4Cl5 g/L,KH2PO4 2 g/L,MgSO4 0.3 g/L,CaCl2 0.6 g/L,聚乙二醇6000 4 g/L,木薯渣厌氧发酵残渣10 g/L,pH 6.5。
3.根据权利要求1所述的木薯渣厌氧发酵残渣为碳源生产地霉菌纤维素酶及其糖化的方法,其特征在于其中步骤(2)中[Emim][DEP]-磷酸-水预处理总体系与木薯渣厌氧发酵残渣的质量比为15:1。
4.根据权利要求1所述的木薯渣厌氧发酵残渣为碳源生产地霉菌纤维素酶及其糖化的方法,其特征在于其中步骤(2)中1-乙基-1-甲基-咪唑-二乙基磷酸盐([Emim][DEP])-磷酸-水预处理体系中质量份数组成如下:
1-乙基-1-甲基-咪唑-二乙基磷酸盐 70-85份、
磷酸 0.5-5份、
水 14.5-25份。
5.根据权利要求1所述的木薯渣厌氧发酵残渣为碳源生产地霉菌纤维素酶及其糖化的方法,其特征在于其中步骤(2)中乙酸-乙酸钠缓冲液和纤维素酶发酵液的体积比为8:2。
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