[发明专利]一种固体海洋红酵母制剂及其制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种固体海洋红酵母制剂及其制备方法和应用。

背景技术

海洋红酵母是存在于海洋自然环境中的单细胞真核生物，富含蛋白质、肝糖、不饱和脂肪酸、动物幼体生长激素及以虾青素为主的类胡萝卜素等多种营养物质，能显著提高养殖动物幼体的存活率，改善成体饲养效果，并能增强水产动物免疫力、减少抗生素用量，是生态养殖的优良添加剂；另外其适口性好，细胞大小在4～6μm之间, 非常适宜替代传统饵料单细胞藻类作为海产动物幼体的开口饵料和整个幼体时期的补充性饵料，海洋红酵母作为一种生物饵料，被广泛应用于鱼类、虾蟹类、贝类、参类等水产品的育苗与成体养殖。鲜活海洋红酵母生态饵料为液体，产品存在保质期短、需要冷藏等不利于长期保存和长途运输的缺点。专利公开号CN1415738A，公开日为2003年5月7日的专利“一种固体海洋红酵母的淀粉吸附流化床干燥生产工艺”；专利公开号CN1415739A，公开日为2003年5月7日的专利“一种固体海洋红酵母的喷雾干燥生产方法”；专利公开号CN1415740A，公开日为2003年5月7日的专利“一种固体海洋红酵母的麸皮吸附干燥生产方法”，这些发明在说明书中公开了海洋红酵母的液体深层通气连续流加的培养方法，后期处理采用喷雾干燥或载体吸附流化床干燥生产方法，这些方法生产的固体海洋红酵母产品细胞密度与活菌率分别为50～100亿/克、20～30%，但也存在的如下的缺点：固体海洋红酵母产品细胞密度低，活菌率不够高。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种固体海洋红酵母制剂，该固体海洋红酵母制剂为粉剂，与传统方法相比，细胞密度和存活率具有显著的提高，且由于产品为固体形式，保质期长，便于运输与冷藏。

本发明所要解决的技术问题还在于提供上述固体海洋红酵母制剂的制备方法，该制备方法先采用液体深层通气连续流加的培养方式进行海洋红酵母菌的高密度培养，提高了海洋红酵母的产量，后期处理采用真空冷冻干燥方法，得到高活性、高密度的海洋红酵母固体菌粉。

本发明所要解决的技术问题还在于提供上述固体海洋红酵母制剂作为水产饲料添加剂的用途。

本发明所要解决的第一个技术问题是通过如下技术方案来实现的：一种固体海洋红酵母制剂，它主要由复合保护剂和浓缩的海洋红酵母菌泥制成，二者的质量比为1.5~2.2︰1，所述的复合保护剂包括脱脂奶粉、蔗糖和水，所述的固体海洋红酵母制剂中海洋红酵母的细胞密度为2000~4000亿/克，细胞活性为70~80%。

本发明所述复合保护剂中脱脂奶粉的质量百分含量为5%，蔗糖的质量百分含量为10%。

本发明所述的浓缩的海洋红酵母菌泥通过如下方法制备获得：

(1) 活化传代培养：以海洋红酵母胶红酵母为菌种，以种子培养液为培养基，菌种采用斜面活化传代，培养温度为24～30℃，培养时间为36～48小时；

(2) 摇瓶扩大培养：挑取2~3环斜面活化传代后的菌种接种于150mL种子培养液中，在24～30℃、150～250 rpm条件下摇瓶培养28～36小时；然后，将培养液按5~10%的质量百分含量转接种于3L～5L种子培养液中，按相同条件进行再次培养；

(3) 种子罐扩大培养：将摇瓶扩大培养后的培养液按5~10%的质量百分含量接种入30L种子培养液中，调节通气量为1：0.6V.V.m， 通气搅拌速度为300～450 rpm、温度为24～30℃培养22～28h，接着将培养液按5~10%的质量百分含量转接种于500L种子罐培养液中，按相同条件进行再次培养；

(4) 发酵罐培养：将经种子罐扩大培养的培养液按5~10%的质量百分含量转接于发酵培养液中，通气量为1：0.6 V.V.m，搅拌速度为300～450 rpm，温度为24～30℃，通气培养20～28h；在发酵培养过程中流加氨水，流加氨水的用量以发酵液pH5.0为控制点，当发酵罐内的溶氧开始上升时，终止发酵；

(5) 离心、洗涤、浓缩：发酵液经离心分离，得到浓缩的酵母菌泥，浓缩后的酵母菌泥经水洗后再次离心浓缩处理，4℃低温保存得到的浓缩的海洋红酵母菌泥。

本发明步骤(1)-(3)中采用的种子培养液含以下重量份的组分：水1000、 葡萄糖35～45、蛋白胨 1.8～2.2、 酵母粉 5.5～6.5、 磷酸二氢钾 0.8～1.2、磷酸二氢钠 2.8～3.2、硫酸镁 7.0～8.0、氯化钾 2.8～3.2、氯化钠 5～15，其pH为5.0～5.5，该种子培养液在使用前经121℃下高压灭菌20min。