[发明专利]白细胞介素-1α 抗体及使用方法

说明书

本申请是申请日为2009年6月1日，申请号为200980125033.6，发明名称为“白细胞介素-1α抗体及使用方法”（此为修改后的发明名称，原发明名称为IL-1α抗体及使用方法）的申请的分案申请。 

相关申请的交叉引用 

本申请要求分别于2008年5月30日、2008年12月10日和2009年5月14日提交的美国临时专利申请系列第61/057,586号、第61/121,391号和第61/178,350号的优先权。 

关于联邦政府赞助的研究的声明 

不适用。 

发明领域

本发明总的来说涉及免疫学、炎症、癌症、血管病症和医学领域。更具体地，本发明涉及特异性结合白细胞介素-1α（IL-1α）的抗体（Ab）以及使用这种抗体治疗、预防或检测与异常的IL-1α表达相关的病理的方法。 

背景 

IL-1α是促炎细胞因子，它在大量不同活性中发挥重要作用，所述大量不同活性包括炎症、免疫应答、肿瘤转移和血细胞生成。针对IL-1α的IgG自身抗体天然地存在于普通人群中并被认为有益于诸如动脉粥样硬化等疾病。 

概述 

本发明基于完全人单克隆抗体（mAb）的开发，所述完全人单克隆抗体包含（i）抗原结合可变区，所述抗原结合可变区表现出对人IL-1α的非常高的结合亲和力，和（ii）恒定区，所述恒定区对于通过C1q结合而活化补体系统以及对于与几种不同的Fc受体结合都有效。本文描述的IL-1α特异性的mAb通过用人IgG1mAb的恒定区取代人IgG4mAb的恒定区而制得，所述人IgG4mAb具有对人IL-1α特异性的可变区。 

因此，本发明的特征是与人IL-1α特异性结合的纯化的人IgG1mAb，所述mAb包含与轻链共价连接的重链。所述重链可包含SEQIDNO:9的氨基酸序列并且所述轻链可包含SEQIDNO:11的氨基酸序列。 

一组分离的核酸也在本发明之中，这组分离的核酸包含编码与IL-1α特异性结合的人IgG1mAb的重链的第一核酸，以及编码与人IL-1α特异性结合的人IgG1mAb的轻链的第二核酸。所述第一核酸可以编码SEQID NO:9的氨基酸序列且所述第二核酸可以编码SEQIDNO:11的氨基酸序列。所述第一核酸可包含SEQIDNO:10核苷酸序列且所述第二核酸可包含SEQIDNO:12的核苷酸序列。 

在一些实施方案中，上述组的分离的核酸可被包含在至少一种表达载体内。 

在一些实施方案中，上述组的分离的核酸可被包含在分离的宿主细胞中。 

在另一方面，本发明的特征是一种表达载体，该表达载体包含编码SEQIDNO:9或SEQIDNO:11的氨基酸序列的核酸。 

本发明的另一个特征是包含一组分离的核酸的分离的宿主细胞（例如，哺乳动物细胞，诸如CHO细胞），这组分离的核酸包含编码与IL-1α特异性结合的人IgG1mAb的重链的第一核酸，以及编码与人IL-1α特异性结合的人IgG1mAb的轻链的第二核酸。所述重链可包含SEQIDNO:9的氨基酸序列并且轻链可包含SEQIDNO:11的氨基酸序列。 

本发明的特征还是杀伤表达人IL-1α的细胞的方法。该方法可包括使所述细胞接触与人IL-1α特异性结合的纯化的人IgG1mAb的步骤。 

在一些实施方案中，所述人IgG1单克隆抗体可包含重链和轻链，所述重链可包含SEQIDNO:9的氨基酸序列并且所述轻链可包含SEQID NO:11的氨基酸序列。 

抑制人细胞穿过基膜基质迁移的方法也在本发明之中。该方法可包括将与人IL-1α特异性结合的纯化的mAb添加到包括基膜基质和人细胞的混合物中的步骤。 

在一些实施方案中，所述纯化的单克隆抗体可以是包含与轻链共价连接的重链的人IgG1单克隆抗体。 

在一些实施方案中，所述重链可包含SEQIDNO:9的氨基酸序列并且轻链可包含SEQIDNO:11的氨基酸序列。 

还在本发明中的是抑制IL-1α诱导的在人内皮细胞表面上的ICAM-1和/或E-选择素的表达增加的方法。该方法可以包括将与人IL-1α特异性结合的纯化的mAb添加到包含内皮细胞和IL-1α的混合物中的步骤。