[发明专利]一种疫苗组合物及其制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种疫苗组合物，以及该疫苗组合物的制备方法和应用。

背景技术

猪伪狂犬病(Pseudorabies，PR)是多种动物共患的传染病，引起家畜和野生动物急性致死性的传染病，以发热、奇痒和脑脊髓炎为主要症状，猪是其自然易感宿主，主要引起妊娠母猪流产、死胎和木乃伊胎，仔猪感染主要是神经症状，成年猪则以隐性感染为主。

猪伪狂犬病是一种由伪狂犬病毒引起的高死亡率的急性传染病。猪伪狂犬病病毒(PRV)属于疱疹病毒科(Herpesvirdae)、α2疱疹病毒亚科(Alpherpesvirinae)。目前仅发现一种血清型的PRV。该病最早发现于美国，后由匈牙利学者Aujeszky首次分离出该病毒，因而又称奥耶斯基病(Aujeszkys Disease)。目前该病分布于全世界50多个国家和地区，对养猪业的发展构成了严重的威胁，已引起世界各国的高度关注。该病在我国的发生已较严重，是现在危害我国规模养猪业最严重的疫病之一。猪伪狂犬病的发生往往继发或混合感染一种或几种某些病毒性，细菌性，寄生虫性疾病。这种混合感染的诊断与防治都十分困难。猪伪狂犬病病毒可侵害各种日龄阶段的猪，病毒可在康复猪的嗅球、三叉神经节和其他神经组织中潜伏，在猪受到体内外因素的刺激时，体内的病毒活化后通过排毒和传播，引起妊娠母猪流产、死胎或木乃伊胎，即使具有较高的母源抗体水平的哺乳仔猪在受到野毒感染时，也会出现神经症状，如麻痹，最后因衰竭而死亡，而不易致死的，也会表现出体温升高、食欲下降等临床症状，且耐过病后常出现生长阻滞。猪伪狂犬病野毒更可能诱导或加剧呼吸道症状，也可能与断奶后的腹泻有关，并且还可降低猪的机体对其他疫苗如猪瘟疫苗的体液免疫应答能力，抑制抗体水平的升高。猪伪狂犬病病毒的持续性感染和潜在的免疫抑制，对于猪的疾病防治工作带来了很大的困难。目前，进行疫苗接种是预防、控制甚至消灭伪狂犬病最主要的措施之一。国内外已研制出猪伪狂犬病的常规弱毒疫苗、灭活疫苗、基因缺失弱毒疫苗和基因缺失灭活疫苗，而病毒载体重组疫苗和基因疫苗尚处于实验室研究阶段。基因缺失疫苗已在生产中发挥着重要的作用，尤其在美国和欧洲一些发达国家的PRV根除计划中功不可没。

当前伪狂犬疫苗的种类有：一：灭活苗。优点是安全，不会散毒；缺点是免疫效果不是很好。二：自然缺失弱毒活疫苗，弱毒活疫苗是将分离到的野毒株经非猪源细胞反复传代，或适应鸡胚，或加入致突变剂在高于一般的培养温度条件下，在细胞上反复传代而获得的疫苗。目前使用较多的是Bartha、Buk毒株。优点是弱毒苗具有良好的免疫原性，而且价格低廉，至今仍在伪狂犬病的防控中起着重要作用。缺点是未经充分致弱的弱毒苗的毒力可能会返强而导致疾病的流行；弱毒疫苗可建立潜伏感染，并有可能散毒。三，基因工程疫苗：包括基因工程缺失弱毒活疫苗、亚单位疫苗、核酸疫苗、重组病毒疫苗。（一）1.基因工程缺失弱毒活疫苗优点：都缺失了目的基因的几百甚至几千个碱基，缺失区域明确，所以它们返祖的可能性极小。2.基因工程缺失弱毒活疫苗缺点：基因缺失疫苗能否引起潜伏感染或被激活为感染性病毒令人担忧。（二）亚单位疫苗：是利用PRV保护性抗原基因，在原核或真核系统中表达所获得的产物制成的疫苗。1.亚单位疫苗的优点:不含有核酸物质因此比较安全，接种后不会产生持续感染或潜伏感染。产生的免疫应答可以与野毒感染相区分，有利于疫病的控制和消灭。2.亚单位疫苗的缺点:生产成本高，免疫原性不及弱毒疫苗及灭活疫苗，应用受到限制。（三）核酸疫苗：核酸疫苗是指将编码外源蛋白质的核酸表达载体注射入机体，以激发机体产生针对外源蛋白质特异性的免疫应答。1.核酸疫苗的优点:能克服伪狂犬病病毒的潜伏感染，安全性高，免疫期长，而且能激发细胞免疫。2.核酸疫苗的缺点:虽然核酸疫苗的免疫能产生较高的抗体水平，但对强毒攻击的保护力不理想。（四）重组疫苗。重组疫苗的优点：载体病毒较稳定，免疫原性持久，删除毒力基因的活载体疫苗能诱发体液免疫和细胞免疫，避免了灭活苗免疫的缺点，接种方便安全。重组疫苗的缺点：有些载体对人或动物具有潜在致病性，对人或动物具有潜在的威胁。另外，重复使用会使动物对载体病毒产生免疫反应。