[发明专利]用于高灵敏度荧光分析的检测系统和方法有效
申请号: | 201310549211.6 | 申请日: | 2010-03-02 |
公开(公告)号: | CN103604786B | 公开(公告)日: | 2017-01-11 |
发明(设计)人: | 谭洪;罗伯特·F·祖克;谭玉山;曹二华;夏明;陈骏 | 申请(专利权)人: | 万迈医疗仪器有限公司 |
主分类号: | G01N21/64 | 分类号: | G01N21/64;G01N33/543 |
代理公司: | 北京商专永信知识产权代理事务所(普通合伙)11400 | 代理人: | 邬玥,葛强 |
地址: | 美国加利*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 灵敏度 荧光 分析 检测 系统 方法 | ||
1.用于在荧光分析中测量荧光信号的检测系统,包括:
长度比宽度的纵横比至少为5比1的探针,该探针具有远端和近端,该近端具有和荧光标记结合的传感表面;
用于直接发射激发光至该探针的传感表面的光源;
朝向该传感表面的会聚透镜;和
用于检测该发射荧光的光学探测器;其中这些会聚透镜会聚此发射荧光并将其引导至该光学探测器。
2.根据权利要求1的系统,其中该探针梢端表面的直径等于或小于5毫米。
3.根据权利要求1的系统,其中该探针是透明的。
4.根据权利要求3的系统,其中该探针的远端是锥形和/或粗糙的,以减少不希望的反射。
5.根据权利要求3的系统,其中该光源被对准,以使该光束以大于此探针的数值孔径角度的入射角投射在在该梢端表面上。
6.据权利要求1的系统,其中该探针是非透明的整体式的杆。
7.根据权利要求1的系统,其中该传感表面被覆盖以选自铝,金,或银的膜,该膜厚度为约50纳米至约500微米。
8.根据权利要求1的系统,进一步包括含溶液的容器,其中该探针的近端被浸入该溶液中,并且该光源和会聚透镜被安装在该容器的底部上。
9.在液体样品中检测被分析物的方法,包括步骤:
获取一探针,其具有被固定在该探针梢端的第一抗体,其中该梢端表面的直径≤5毫米;
将该探针梢端浸入含液体样品的容器中,该液体样品含有被分析物;
在该样品容器中上下移动该探针梢端并在该样品容器中水平流动该试剂溶液,以将该被分析物和该第一抗体结合;
将该探针梢端浸入含试剂溶液的试剂容器中,该试剂溶液包括分子量至少为一百万道尔顿,并且和至少5个第二抗体分子和至少25个荧光标记结合的聚合物;
在该样品容器中上下移动该探针梢端并在该样品容器中水平流动该试剂溶液,以在该探针梢端上形成该被分析物,该第一抗体,和该第二抗体之间的免疫复合体;
将该探针梢端浸入含洗液的洗涤容器中,和
通过检测该探针梢端上的荧光信号检测该形成的免疫复合体;
其中该第一抗体和该第二抗体是针对该被分析物的抗体。
10.在液体样品中检测被分析物的方法,包括步骤:
获取一探针,其具有被固定在该探针梢端的第一抗体,其中该梢端表面的直径≤5毫米;
将该探针梢端浸入样品容器中,该样品容器包含(i)具有被分析物的液体样品和(ii)包括分子量至少为一百万道尔顿,并且和至少5个第二抗体分子和至少25个荧光标记结合的聚合物的试剂溶液;
在该样品容器中上下移动该探针梢端并在该样品容器中水平流动该试剂溶液,以在该探针梢端上形成该被分析物,该第一抗体,和该第二抗体的免疫复合体;
将该探针梢端浸入含洗液的洗涤容器中;和
通过检测该探针梢端上的荧光信号检测该形成的免疫复合体;
其中该第一抗体和该第二抗体是针对该被分析物的抗体。
11.在液体样品中检测被分析物的方法,包括步骤:
(a)获取一探针,其具有被固定化在该探针梢端的第一抗体,其中该梢端表面的直径≤5毫米;
(b)将该探针梢端浸入样品容器中,该样品容器含有具有被分析物的样品溶液,在该样品容器中上下移动此探针梢端并水平流动该样品溶液;
(c)将该探针梢端浸入含试剂溶液的试剂容器中,该试剂溶液包括和一结合配对的第一成员结合的第二抗体分子,在该试剂容器中上下移动该探针梢端并水平流动该试剂溶液;
(d)将该探针梢端浸入含扩增溶液的扩增容器中,该扩增溶液包括分子量至少为一百万道尔顿,并且和该结合配对的至少5个第二成员以及至少25个荧光标记结合的聚合物,在该扩增容器中上下移动该探针梢端并水平流动该扩增溶液,以在该探针梢端上形成该被分析物,该第一抗体,该第二抗体,和该结合配对的第一和第二成员的免疫复合体;
(e)将该探针梢端浸入含第二洗液的第二洗涤容器中;和
(f)通过检测该探针梢端上的荧光信号检测形成的免疫复合体,其中该第一抗体和该第二抗体是针对该被分析物的抗体。
12.根据权利要求9,10,或11的方法,其中该梢端表面的直径小于约2毫米。
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