[发明专利]磷脂酶C突变体及其用途

权利要求书

1.具有磷脂酰胆碱特异性磷脂酶C活性的多肽，所述多肽由突变的SEQ ID No:2所示的氨基酸序列组成，其中所述突变为将SEQ ID No:2所示的氨基酸序列的第63位的天冬酰胺突变为丝氨酸(S)、丙氨酸(A)、苯丙氨酸(F)、组氨酸(H)、赖氨酸(K)、精氨酸(R)、色氨酸(W)、酪氨酸(Y)、半胱氨酸(C)、天冬氨酸(D)、谷氨酸(E)、甘氨酸(G)、异亮氨酸(I)、亮氨酸(L)、蛋氨酸(M)、谷氨酰胺(Q)、苏氨酸(T)或缬氨酸(V)。

2.如权利要求1所述的多肽，所述多肽的氨基酸序列由选自SEQ ID No:8、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、38、40、42、44、46或48的氨基酸序列组成。

3.具有磷脂酰胆碱特异性磷脂酶C活性的多肽，所述多肽由突变的SEQ ID No:2所示的氨基酸序列组成，其中所述突变为：

将SEQ ID No:2所示的氨基酸序列的第63位的天冬酰胺突变为丝氨酸(S)、丙氨酸(A)、苯丙氨酸(F)、组氨酸(H)、赖氨酸(K)、精氨酸(R)、色氨酸(W)、酪氨酸(Y)、半胱氨酸(C)、天冬氨酸(D)、谷氨酸(E)、甘氨酸(G)、异亮氨酸(I)、亮氨酸(L)、蛋氨酸(M)、谷氨酰胺(Q)、苏氨酸(T)或缬氨酸(V)；

将SEQ ID No:2氨基酸序列的第20位的精氨酸突变为组氨酸；以及

将SEQ ID No:2氨基酸序列的第83位的丙氨酸突变为天冬氨酸。

4.如权利要求3所述的多肽，其中所述多肽的氨基酸序列由SEQ ID No:12所示的氨基酸序列组成。

5.编码权利要求1-4中任一项所述的多肽的核酸分子。

6.如权利要求5所述的核酸分子，其由选自SEQ ID No:7、11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、37、39、41、43、45或47的核酸序列组成。

7.包含权利要求5或6所述的核酸分子的载体。

8.如权利要求7所述的载体，其中所述载体为表达载体。

9.如权利要求8所述的载体，其中所述载体被设计用于真核细胞或原核细胞中表达。

10.如权利要求9所述的载体，其中所述载体被设计用于细菌细胞、真菌细胞、哺乳动物细胞、昆虫细胞或植物细胞中表达。

11.如权利要求9所述的载体，其中所述载体被设计用于酵母细胞中表达。

12.包含权利要求5或6所述的核酸分子或权利要求7-11中任一项所述的载体的细胞。

13.如权利要求12所述的细胞，其为真核细胞或原核细胞。

14.如权利要求13所述的细胞，其为细菌细胞、真菌细胞、哺乳动物细胞、昆虫细胞或植物细胞。

15.如权利要求13所述的细胞，其为酵母细胞。

16.使用权利要求12-15中任一项所述的细胞产生的磷脂酶C。

17.权利要求1-4中任一项所述的多肽、或权利要求5或6所述的核酸分子编码的多肽、或权利要求7-11中任一项所述的载体编码的多肽、或权利要求16所述的磷脂酶C作为磷脂酰胆碱特异性磷脂酶C的用途。

18.如权利要求17所述的用途，其中所述用途为在油脂脱胶工艺中的用途。