[发明专利]用鲟鱼脊骨制备低分子量鲟鱼硫酸软骨素的方法

权利要求书

1.用鲟鱼脊骨制备低分子量鲟鱼硫酸软骨素的方法，其特征在于，具体步骤如下：

（1）制备鲟鱼脊骨颗粒：将鲟鱼脊骨投入60℃-100℃水中烫浸5-20分钟，取出，剔除软骨上少量残留的肌肉、脂肪和其他结缔组织，切成2-5cm长度小块，水洗两次，50℃-80℃干燥4-8h，粉碎，过20目的筛；

（2）提取鲟鱼硫酸软骨素：将步骤（1）得到的鲟鱼脊骨颗粒加5-10倍量5%-10%的NaOH，于30-60℃的水浴中搅拌提取3-6h，得鲟鱼硫酸软骨素提取液；

（3）鲟鱼硫酸软骨素的酶解：将步骤（2）得到的鲟鱼硫酸软骨素提取液调pH至7-9，加胰蛋白酶和木瓜蛋白酶的混合酶1.5%-5%，40℃-60℃保温水解3-6h，取出于80℃-100℃热水中灭酶；胰蛋白酶和木瓜蛋白酶的混合质量比1：1；

（4）脱色工艺：将步骤（3）灭酶的溶液调pH至6-8，加溶液体积10%-20%的活性炭于50℃-80℃水浴脱色，过滤；

（5）将步骤（4）所得滤液调pH至5-7，边搅拌边加入80%-95%乙醇至醇沉体系的乙醇浓度为50%-80%，室温静置过夜，取沉淀无水乙醇脱水两次，50℃-80℃控温干燥2-5h，粉碎；

（6）低分子量鲟鱼硫酸软骨素的制备工艺：将步骤（5）得到的硫酸软骨素配成5%-15%溶液，加入草酸使体系草酸浓度控制在5%-15%，降解时间1-2小时，反应温度50-70℃，然后通过钴⁶⁰γ射线辐照，调pH至5-7，边搅拌边加入80%-95%乙醇至醇沉体系的乙醇浓度为50%-80%，室温静置过夜，取沉淀，于50℃-80℃干燥2-5h，利用行星式齿轮球磨机，球磨5～15h，得低分子量鲟鱼硫酸软骨素产品；

钴⁶⁰γ射线辐照剂量为5-15kGy。

2.根据权利要求1所述的用鲟鱼脊骨制备低分子量鲟鱼硫酸软骨素的方法，其特征在于在所述的步骤（1）中投入90℃水中烫浸10分钟左右，取出，切成小块，水洗两次，60℃干燥7h。

3.根据权利要求1所述的用鲟鱼脊骨制备低分子量鲟鱼硫酸软骨素的方法，其特征在于在所述的在步骤（2）中以7倍量6%的NaOH为溶剂溶解鲟鱼脊骨颗粒，于40℃的水浴中搅拌提取4.5h。

4.根据权利要求1所述的用鲟鱼脊骨制备低分子量鲟鱼硫酸软骨素的方法，其特征在于在所述的在步骤（3）中将（2）步骤得到的浸提液调pH至8.5，加入胰蛋白酶和木瓜蛋白酶的混合酶2.5%，55℃保温水解5h。

5.根据权利要求1所述的用鲟鱼脊骨制备低分子量鲟鱼硫酸软骨素的方法，其特征在于在所述的步骤（5）中滤液调pH至7，加入95%乙醇至体系的乙醇浓度为70%，无水乙醇脱水2次，60℃控温干燥4h。

6.根据权利要求1所述的用鲟鱼脊骨制备低分子量鲟鱼硫酸软骨素的方法，其特征在于在所述的步骤（6）中硫酸软骨素配成5%-15%溶液，加入草酸使体系草酸浓度控制在5%-10％草酸降解，通过照剂量为8kGy钴⁶⁰γ射线辐照，调pH至7，边搅拌边加入95%乙醇至醇沉体系的乙醇浓度为70%，室温静置过夜，取沉淀，于60℃干燥4h，利用行星式齿轮球磨机，球磨10h，得低分子量鲟鱼硫酸软骨素产品；

钴⁶⁰γ射线辐照剂量为8kGy。