[发明专利]一种气味沙雷氏菌及其生产组胺的方法

说明书

技术领域

    本发明涉及微生物领域，特别是一种气味沙雷氏菌及其生产组胺的方法。 

背景技术

组胺是一种活性胺化合物，化学式是C₅H₉N₃，分子量是111.15。中文同名词为1H-咪唑-4-乙胺、2-咪唑基乙胺、组织胺、Β-氨基乙基咪唑、Β-氨乙基甘噁啉、组氨、麥角胺，是合成药物的重要中间体，也可以作为生化试剂，目前，我国组胺需求量大，多数从国外进口，价格昂贵。 

传统的组胺生产是采用人工合成，这种方法生产的组胺纯度低，生产效率低，并且难以提纯。通过微生物代谢产生组胺，获得高浓度组胺液，然后提取组胺，确实能降低组胺的生产成本和能源消耗，也成为研究的主要方向。 

    气味沙雷氏菌（Serratia odorifera）是沙雷氏菌属 (SerratiaBizio)中的一种。菌体直杆状，直径0.5～0.8μm，长0.9～2.0 μm，端圆。符合肠杆菌科的一般描述。通常周生鞭毛运动。兼性厌氧。菌落大多数不透明，有些虹彩；白色、粉红或红色。在自然界分布很广，是水和土壤中的常居菌群，是引起医院内感染的重要条件致病菌。可引起多种感染，如尿路感染、创伤感染、肺炎、脓胸、肺脓肿、腹膜炎、心内膜炎及败血症等。 

     气味沙雷氏菌与少数肺部感染及尿路感染有关。但已被证实的气味沙雷氏菌中，未见高产组胺报道。 

发明内容

     针对目前人工合成组胺纯度低的问题，提供一种气味沙雷氏菌并通过该菌代谢产生高浓度组胺液。 

     本发明是这样实现的：一种气味沙雷氏菌（Serratia odorifera），其特征在于：保藏号为CGMCC No. 7781。 

     一种利用所述气味沙雷氏菌生产组胺的方法，其特征在于： 

1）将菌落接种于装有A培养基的试管中活化，接种量为10⁵cfu/ml，37℃静置培养24小时，重复上述步骤五次；

2）将步骤1）的菌液接种到B培养基中，接种量为10⁶cfu/ml，37℃静止培养4天；

3）将步骤2）培养的菌液放入离心机中， 10000转离心10分钟，取上清液，即为组胺液；

所述的A培养基为：改良MSA液体培养基中添加质量比为0.1%组氨酸；

所述的B培养基为：改良MSA液体培养基中添加质量比为0.005%的磷酸吡哆醛和质量比为0.1%的组氨酸；

所述改良MSA液体培养基为：蛋白胨10g，牛肉膏1g，D-甘露醇10g，NaCl 40g，酚红0.025g，蒸馏水1000mL，pH值7.2~7.6，115℃灭菌15分钟。

 本发明的优点在于，由于保藏号为CGMCC No. 7781的气味沙雷氏菌（Serratia odoridera）产组胺能力强，所得组胺液浓度高，可以极大降低生产成本和节约能源。 

附图说明

图1为气味沙雷氏菌电子显微镜照片。 

图2为高效液相色谱检测组胺标准曲线。 

图3检测气味沙雷氏菌产组胺高效液相色谱图。 

具体实施方式

实施例1 

实施例1   气味沙雷氏菌Serratia odorifera.的筛选和保藏

培养基配方：

改良MSA液体培养基：蛋白胨10g，牛肉膏1g，D-甘露醇10g，NaCl 40g，酚红0.025g，蒸馏水1000mL，pH值7.2~7.6，115℃灭菌15分钟。

下层培养基：胰蛋白胨10g，牛肉膏1g，D-甘露醇10g，NaCl 40g，磷酸吡哆醛0.05g，组氨酸5g，琼脂18g，1000ml蒸馏水，pH值5.5，115℃高压灭菌15分钟。 

上层培养基：溴甲酚紫0.06g，琼脂15g，1000ml蒸馏水, pH值5.5, 121℃灭菌10分钟。 

改良MSA固体培养基：在改良MSA液体培养基中加入质量比为1.8%的琼脂。 

筛选方法：