[发明专利]抗人葡萄糖-6-磷酸异构酶单克隆抗体的用途

说明书

技术领域

本发明属于细胞生物学领域，尤其涉及一种关于细胞增殖、凋亡和分泌的小分子蛋白，具体来说是一种抗人葡萄糖-6-磷酸异构酶单克隆抗体（抗GPI单抗）在制备促进类风湿关节炎滑膜成纤维细胞凋亡的药物中的应用。

背景技术

类风湿关节炎（rheumatoid arthritis，RA）是一种慢性、全身性、自身免疫性疾病，其特征是外周关节的非特异性、对称性慢性炎症，关节滑膜的慢性炎症、增生，形成血管翳，侵犯关节软骨、软骨下骨、韧带和肌腱等，造成关节软骨、骨和关节囊破坏，最终导致关节畸形和功能丧失，部分患者伴不同程度的全身表现。

类风湿关节炎(RA)在中国是一个常见的多发性自身免疫疾病，患病率约为0.3％～0.4％，美国本病患者约占人群的1％，女性发病率较男性高2～3倍。各年龄组人群均可发病，但25～50岁为本病的好发年龄。RA关节病变是从滑膜开始的，滑膜充血、水肿、滑膜表面有纤维蛋白渗出物覆盖；滑膜表层细胞增生、滑膜组织内各种炎症细胞浸润、血管新生。随着炎症持续和反复，在新生血管周围的滑膜成纤维样细胞增生明显，形成肉芽肿，与软骨粘连，并侵蚀软骨。滑膜增生逐渐向软骨中心部位蔓延，阻断了软骨由滑液中吸收营养，软骨逐步被吸收。同时由于溶酶体内的蛋白降解酶、胶原酶的释放，使软骨基质破坏、溶解，导致关节软骨广泛破坏，关节间隙变窄，关节面粗糙不平，血管翳机化后形成粘连，纤维组织增生，关节腔内形成广泛粘连，而使关节功能明显受限，形成纤维性强直。从RA受累关节病理变化过程可看出，关节滑膜炎症、成纤维样细胞增生和血管新生是导致RA关节不可逆病变的根源。

本发明人近十年致力于有关RA实验室诊断指标试剂盒研发及RA生物治疗药物的研发。在辅助诊断生物指标上，已成功获得发明专利两项，《变性变构型环瓜氨酸多肽及其融合蛋白、技术和试剂盒》（中国专利号200810203396.4）和《GPI抗原酶联免疫法体外定量测定诊断试剂盒》（中国专利号CN200410016140.4）。GPI（又称G6PI）ELISA检测试剂已经临床应用，检测诊断RA敏感度为76.1%、特异性达93.5%，血清GPI含量与RA病情活动状态相关、且在血清GPI阳性的RA患者关节液中也检测到GPI浓度异常升高（Fan LY,et al.ClinicaChimicaActa2010,411:2049-2053）。

本发明是在前期有关RA实验室诊断指标专利发明基础上向RA治疗领域的拓展。GPI是一个多功能蛋白，在细胞内是糖酵解和糖异生的关键酶，催化葡萄糖6磷酸与6磷酸果糖间转化；在细胞外，GPI分子与两个细胞外因子，自分泌蠕动因子（Autocrine Motility Factor，AMF）和神经介素（neuroleukin，NLK)高度同源，三者是同一基因的产物（Watanabe H,et al.Cancer Res1996,56:2960-2963.）。AMF是肿瘤细胞分泌的自分泌细胞因子，能够通过受体（AMFR）介导的信号途径刺激肿瘤细胞，在多种肿瘤研究中显示（包括胃癌、胰腺癌、乳腺癌、肺癌和肝癌等）与肿瘤细胞生长、进展和转移相关（Tsutsumi S,et al.Clin Cancer Res2004,10:7775-7784.Jiang WG,et al.J Histochem Cytochem2006,54:231–241.）。本发明人发现在人RA关节滑膜中也存在类似肿瘤中的现象，即重组人源性GPI能够促进分离培养的RA、骨关节炎（OA）关节滑膜成纤维样细胞（RA-FLS、OA-FLS）生长，而抗人源性GPI单抗则能有效地抑制RA-FLS、OA-FLS增生、促进细胞凋亡，同时还抑制FLS分泌炎症细胞因子IL-1、TNF-α。

本发明针对RA最主要的病理变化提供了一个全新、有效的防治新技术，不仅为GPI参与RA发病机制提供了实验依据，而且为RA诊断、预防和治疗提供了新的疾病靶标，为后续建立人源性GPI单抗治疗RA生物疗法奠定了必要的基础，有广泛的临床应用前景。

发明内容

为了解决现有技术中的上述技术问题，本发明提供了一种抗人葡萄糖-6-磷酸异构酶单克隆抗体（抗GPI单抗）在制备促进类风湿关节炎滑膜成纤维细胞凋亡的药物中的应用。所述的这种抗GPI单抗能明显抑制RA-FLS、OA-FLS的增生，显著降低I L-1、TNF-α的含量。

本发明的目的在于提供一种抗人葡萄糖-6-磷酸异构酶单克隆抗体在制备促进类风湿关节炎滑膜成纤维细胞凋亡的药物中的应用。