[发明专利]一种耐受高PH的斜生栅藻及其选育方法

权利要求书

1.一种耐受高PH的斜生栅藻， 为斜生栅藻突变株（Scenedesmus obliqnus），命名为FSH-Y2，于2012年9月11日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物保藏中心，保藏编号为CGMCC No. 6551。

2.按照权利要求1所述的藻株，其特征在于：FSH-Y2藻株可以耐受的PH值为10～12，在此PH值条件下的生长速率比原始斜生栅藻快2～6倍。

3.按照权利要求1所述的藻株，其特征在于：FSH-Y2藻株的特征为在显微镜下藻细胞呈纺锤形，丛生，有细胞壁膜包裹，颜色为深绿色；单个藻细胞直径约为6～10um。

4.按照权利要求1-3任一所述的斜生栅藻的选育方法，包括以下内容：

（1）配制斜生栅藻生长的BG11培养基；

（2）接种原始斜生栅藻，经光照和黑暗周期诱导，对原始斜生栅藻进行活化；

（3）取对数生长期的斜生栅藻进行紫外诱变，然后进行暗培养；

（4）将暗培养后的藻液用新鲜培养液稀释后涂布到固体培养基上进行光照培养；

（5）挑取生长迅速的单藻落接种到BG11培养液中进行初筛，培养液的PH为8.0～9.0；

（6）将步骤（5）初筛的藻液，接种到逐级提高PH的培养液中进行驯化培养，每次PH提高0.5～1.0，筛选获得耐受高PH的藻株。

5.按照权利要求4所述的方法，其特征在于： 步骤（2）中，按接种液与培养液的体积比为1:10～1:5接种；所述的光照和黑暗周期诱导是在22～32℃的恒温光照反应摇床中进行，光暗反应周期为24h，光暗时间比为12:12；摇床转速为80～160rpm，培养4～7天。

6.按照权利要求4所述的方法，其特征在于：步骤（3）中，取对数生长期的藻液5～10mL置于无菌培养皿中进行紫外诱变；在磁力搅拌下，用30w的紫外灯照射诱变，照射时间为10～20min，紫外灯与培养皿的距离为15～25cm，照射致死率为60%～80%。

7.按照权利要求4所述的方法，其特征在于：步骤（3）中，紫外照射后进行暗培养，培养温度为20～30℃，培养时间为24～72h。

8.按照权利要求4所述的方法，其特征在于：步骤（4）中，将步骤（3）暗反应后的藻液用BG11新鲜培养基稀释10～10000倍，吸取0.1～0.3mL涂布到BG11固体琼脂平板上；在光照培养箱中进行培养，培养温度为20～30℃，光照强度为1000～3000Lux，光暗反应周期为24h，光暗时间比为12:12，培养时间为10d～15d。

9.按照权利要求4所述的方法，其特征在于：在步骤（5）中，在恒温光照摇床中培养，摇床转速为60～180rpm，光照强度为1000～5000Lux，光暗反应周期为24h，培养温度为20～30℃，光暗时间比为12:12，培养时间为10d～15d天。

10.按照权利要求4所述的方法，其特征在于：在步骤（6）中，以1:10～1:5的比例将步骤（5）中挑选的藻落接种到培养基中。