[发明专利]对外周血单核细胞进行分离技术

说明书

技术领域

本发明涉及生化实验领域，具体涉及对外周血单核细胞进行分离技术。 

背景技术

单核细胞（monocytes）是体积最大的白细胞。其细胞核常偏位，呈多形性，如卵圆形、肾形、马蹄形、不规则形等，常有折叠感；染色质呈疏松网状，着色较浅。胞质较多，嗜碱性，但因含大量细小的嗜天青颗粒而染成灰蓝色，颗粒含过氧化物酶。血涂片，Giemsa染色 。单核细胞来源于骨髓中的造血干细胞，并在骨髓中发育。当它们从骨髓进入血液时仍然是尚未成熟的细胞。与其他血细胞比较，单核细胞内含有更多的非特异性脂酶，并且具有更强的吞噬作用。单核细胞在血液中停留2-3天后迁移到周围组织中，细胞体积继续增大，直径可达50-80μm，细胞内所含的溶酶体颗粒和线粒体的数目也增多，成为成熟的细胞。固定在组织中的单核细胞称为组织巨噬细胞，它们经常大量存在于淋巴结、肺泡壁、骨髓、肝和脾等器官。激活了的单核细胞和组织巨噬细胞能生成并释放多种细胞毒、干扰素和白细胞介素，参与机体防卫机制，还产生一些能促进内皮细胞和平滑肌细胞生长的因子。在炎症周围单核细胞能进行细胞分裂，并包围异物。单核细胞能吞噬异物产生抗体，在机体损伤治愈、抗御病原的入侵和对疾病的免疫方面起着重要的作用。机体发生炎症或其他疾病都可引起单核细胞总数百分比发生变化，因此检查单核细胞计数成为辅助诊断的一种重要方法。在机体的防护、免疫和创伤愈治过程中起协同作用。尽管它们是血液中的一类细胞成分，但它们功能的发挥，更多地体现在循环管道外的器官组织中。在功能方面它们与这些器官组织中的许多细胞成分如巨噬细胞、肥大细胞、成纤维细胞等密切相关。 

发明内容

本发明要解决的技术问题在于，针对现有技术缺陷，提供一种技术方案： 

对外周血单核细胞进行分离技术，步骤如下：首先将抗凝血溶剂导入离心管中，然后加入三倍体积的溶解液，充分混合摇匀；领取一个同样体积的离心管，其中加入所需淋巴细胞分离液；将两个离心管中的溶液混合；混合后进行高速离心；其后，将吸管插入分离曾中的第三层，吸取沉淀物；将沉淀物转移至另一个离心管中；将装有沉淀物的离心管中注入混合液，同时洗涤细胞；再进行两次高速离心，弃上清，洗涤后充分收回细胞；弃上清，室温下，将其转移，冷藏即可。

本发明中，在对两个离心管进行混合的时候，需要保持水平离心，同时在室温下。

本发明的有益效果是：操作简单，成本较低，实验条件要求不高，可以用于反复性操作，获得预期效果。 

具体实施方式

对外周血单核细胞进行分离技术，步骤如下：首先将抗凝血溶剂导入离心管中，然后加入三倍体积的溶解液，充分混合摇匀；领取一个同样体积的离心管，其中加入所需淋巴细胞分离液；将两个离心管中的溶液混合；混合后进行高速离心；其后，将吸管插入分离曾中的第三层，吸取沉淀物；将沉淀物转移至另一个离心管中；将装有沉淀物的离心管中注入混合液，同时洗涤细胞；再进行两次高速离心，弃上清，洗涤后充分收回细胞；弃上清，室温下，将其转移，冷藏即可。在对两个离心管进行混合的时候，需要保持水平离心，同时在室温下。 

以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明披露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围之内。