[发明专利]一种白及类原球茎的组织培养快速繁殖方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种植物繁殖方法，特别是一种白及类原球茎的组织培养快速繁殖方法。

背景技术

白及，又名连及草、箬兰、甘根、白根、百笠、白芨、紫蕙，为兰科白及属植物。白及的干燥块茎是我国民间的传统中药，其药用历史源远流长。白及性温、昧苦、甘、辛，具有补肺、散风除湿、通窍止痛、消肿排脓、生肌、敛疮等功效，主要用于治疗感冒头痛、眉棱骨痛、鼻塞、鼻渊、牙痛、白带、肺伤咳血、衄血、金疮出血、痈疽肿毒、溃疡疼痛、汤火灼伤、手足皱裂等。白及止血效果非常好，现在用白及做成胶膜块，用于肝脾手术贴在刀口处，代替血钳子，效果特别好。同时，作为兰科植物，白及株型优美，也是珍贵的野生观赏花卉。

由于白及的疗效确切，利用价值高，经济效益好，市场需求量大，所以近年来白及的野生资源被疯狂采挖，加上天然生境遭到严重破坏，白及的野生自然资源急剧减少，濒临灭绝，被国家列为重点保护的野生药用植物之一。在自然条件下，白及的资源更新非常缓慢，无法跟上市场需要增长的速度，难以维持资源的供需平衡。因此需要大力推广白及的人工栽培，以增加市场供应量，维持供需平衡，实现白及资源的可持续利用。但是种苗的稀缺却是制约着白及人工种植推广的关键问题。白及的种子细小，种子成熟时多处于原胚阶段，在自然条件下需与相适应的真菌共生，萌发率极低，实生苗的栽培也较为困难。另外传统繁育上虽然还可以通过扦插、分株等无性繁殖的方式进行繁殖，但是获得的种苗数量非常有限，成活率极低，所需时间很长，生产上难以实现大面积栽培。而采用生物技术组织培养技术，可以有效快速地提高白及种苗的繁殖速度和质量，实现白及优质种苗的工厂化育苗，以满足生产上的需要。

发明内容

本发明的目的是提供一种白及类原球茎的组织培养快速繁殖方法，它能够快速繁殖出大量优质原球茎，经复壮后可快速繁育出大量成活率高的优良白及种苗、满足生产需要。

本发明通过以下技术方案达到上述目的：一种白及类原球茎的组织培养快速繁殖方法，包括以下步骤：

（1）类原球茎的快速繁殖培养：取白及无菌试管苗，分切成带苗的单个原球茎，接种到MS繁殖培养基中，在培养温度23-27℃，光照强度1500lux，光照时间为12-14小时/天的条件下培养30天得到类原球茎，其中MS繁殖培养基中含1.5-5.0mg/L的6-苄基腺嘌呤6-BA、0.1-0.5mg/L的吲哚乙酸IAA、0.1-0.5mg/L的激动素KT、30g/L蔗糖和3.4g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8；

（2）类原球茎的复壮培养：将步骤（1）中得到的类原球茎置于MS壮苗培养基中，在培养温度23-27℃，光照强度1500lux，光照时间为12-14小时/天的条件下培养25天得到带苗的原球茎，其中MS壮苗培养基中含1.0-2.5mg/L的6-苄基腺嘌呤6-BA、0.2-1.0mg/L的吲哚乙酸IAA、30g/L蔗糖和3.4g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8；

（3）带苗的原球茎生根培养：将步骤（2）中得到的带苗原球茎置于1/2MS生根培养基中，在培养温度23-27℃，光照强度1500lux，光照时间为12-14小时/天的条件下培养45天得到带根的完整植株，其中1/2MS生根培养基中含0.5-1.5mg/L的吲哚乙酸IAA、0.1-0.5mg/L的生根粉ABT、0.3g/L的活性炭、30g/L蔗糖和3.4g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8；

（4）炼苗与移栽：步骤（3）获得带根的完整植株后，在室温为25°的室内打开瓶盖，在瓶中加入少量自来水，炼苗2-4天，表面角质形成后将苗取出，洗净根部培养基，立即移栽到苗床中，在苗床中生长三个月后移栽大田。

本发明的突出优点在于：

（1）采用生物技术对白及进行组织培养快速繁殖，通过白及类原球茎的繁殖，在短时间内可培育出大量适合栽培种植的白及幼苗，显著提高了白及种苗的增殖系数和种苗质量，实现规模化生产，满足生产上的需要。

（2）在MS繁殖培养基中添加的6-苄基腺嘌呤6-BA、吲哚乙酸IAA和激动素KT属于化学合成物质，价格较常规兰科植物组织培养中添加的有机物便宜，但对白及原球茎增殖系数的影响非常显著，从而大大降低了白及组织培养的成本消耗，达到降低成本的目的。