[发明专利]生防菌对黄瓜诱导抗病效果的定性检测方法

权利要求书

1.一种生防菌对黄瓜诱导抗病效果的定性检测方法，其特征在于：该检测方法步骤如下：

（1）无菌苗的培育：

取黄瓜种子用洗衣粉水清洗，用浓度为75%酒精浸泡40-100s，再用无菌水冲洗3次之后，将黄瓜种子在浓度为30%的次氯酸钠溶液中浸泡10-15min，用无菌水冲洗4次，得到消毒后的黄瓜种子A，备用；

将上述消毒后的黄瓜种子A接种至灭菌后的组培瓶中，每瓶播种2-3粒，在白天25-28℃，晚上18-21℃条件下培养5-10天，得到子叶完全展开的黄瓜苗B，备用；

（2）叶片处理

用移液器取生防菌发酵液滴到步骤（1）所得黄瓜苗B的子叶上，在白天25-28℃，晚上18-21℃条件下培养5-7天，得到黄瓜幼苗C，备用；

（3）诱抗检测

将病原真菌孢子悬浮液加入到马铃薯葡萄糖琼脂培养基溶液中，倒平板，晾干后在培养基中央放置牛津杯，将步骤（2）所得黄瓜幼苗C拔出组培瓶，将组培瓶中剩余的培养基混合均匀后置于牛津杯中，在27℃培养3-4天后观测到抑菌圈说明生防菌对黄瓜诱导抗病具有效果。

2.根据权利要求1所述的生防菌对黄瓜诱导抗病效果的定性检测方法，其特征在于：所述的步骤（1）中灭菌后的组培瓶中为MS培养基。

3.根据权利要求1所述的生防菌对黄瓜诱导抗病效果的定性检测方法，其特征在于：所述的步骤（2）中生防菌发酵液的菌量为10⁸-10¹¹个/ml。

4.根据权利要求1所述的生防菌对黄瓜诱导抗病效果的定性检测方法，其特征在于：所述的步骤（3）中马铃薯葡萄糖琼脂培养基溶液与病原真菌孢子悬浮液体积比为100:1。

5.根据权利要求1所述的生防菌对黄瓜诱导抗病效果的定性检测方法，其特征在于：所述的步骤（3）中病原真菌孢子悬浮液在10倍镜下每个视野有40-60个孢子。

6.根据权利要求1所述的生防菌对黄瓜诱导抗病效果的定性检测方法，其特征在于：所述的生防菌包括解淀粉芽孢杆菌TJ、枯草芽孢杆菌HJ和解淀粉芽孢杆菌YL。