[发明专利]细胞色素C注射液

说明书

技术领域

本发明属于医药技术领域，涉及一种药物制剂，特别是涉及一种细胞色素C的药物组合物例如注射液。本发明的细胞色素C药物组合物可用于各种组织缺氧急救的辅助治疗，如一氧化碳中毒、催眠药中毒、氰化物中毒、新生儿窒息、严重休克期缺氧、脑血管意外、脑震荡后遗症、麻醉及肺部疾病引起的呼吸困难和各种心脏疾患引起的心肌缺氧的治疗。

背景技术

细胞色素C(Cytochrome C，Cyt C)或称细胞色素复合体(Cytochrome Complex)，是一种与粒线体内膜有关，结构松散而微小的血红素蛋白。它和其他细胞色素不同，是一种高度可溶性蛋白，可溶性达每升100克。细胞色素C是电子传递链不可或缺的元件，负责携带一粒电子，在复合物III和复合物IV之间传递。此外，它能够接受氧化和还原反应，但不与氧结合。在人体中，细胞色素C已经由CYCS基因完成编码。细胞色素C和细胞程序性死亡有关。

临床上使用的细胞色素C是一种细胞呼吸激动剂，它存在于细胞线粒体中的一种以铁卟啉为辅基的蛋白质。细胞色素C担负传递电子的作用，是细胞呼吸不可少的物质。当组织缺氧时，外源性细胞色素C即能进入细胞内，从而发挥其纠正细胞呼吸和物质代谢作用。本品是存在于细胞线粒体中的一种以铁卟啉为辅基的蛋白质，目前已能提纯分离。药用制剂是从动物心脏或酵母中分离出来的，细胞色素是呼吸链的一环。各种细胞色素按一定顺序排列组成细胞呼吸所不可少的。细胞色素C不能透过细胞膜，因此对正常人无作用，当组织缺氧时、细胞膜通透性增高，外源性制剂即能进入细胞内，从而发挥其纠正细胞呼吸和物质代谢作用。

现有技术已有诸多关于细胞色素C及其药品的制备方法。例如，中国专利申请号94110756.6(CN1106019A，陈庆功)公开了一种从动物心脏中提取细胞色素C粗品的生产工艺，它由原料处理、一次提取、二次提取、吸附、沸石的清洗、洗脱、盐析、沉淀、透析等工艺步骤完成，其特征是吸附工艺采用分层沉淀动态吸附的方法，这样可以缩短吸附时间，提高吸附效率，避免了因吸附时间过长而造成母液变质。

中国专利申请号200910229517.7(CN101709086A，东诚)公开了一种细胞色素C的提取方法。以哺乳动物心肌为原料，采用硫酸铝溶液提取法制备，提取过程中硫酸铝的浓度控制在0.1-10%，硫酸铝溶液的体积控制在1-5倍量心肌体积，提取pH值控制在3-6，反应温度控制在0-30℃，提取时间控制在1-4h。再经吸附洗脱，最终得到细胞色素C。本发明具有方法成本低、步骤简单、提取条件温和、引入杂质少、反应物无污染、适合工业化大生产的特点。

中国专利申请号201110094755.9(CN102206265A，宏业)公开了以哺乳动物心提取细胞色素C溶液的生产方法。将哺乳动物心脏经酸水提取，吸附材料吸附，酸水洗脱，盐析，沉淀及透析法制得细胞色素c溶液粗品，粗品经离子交换纯化，最终精制得细胞色素C溶液。

中国专利申请号201110268301.9(CN102295699A，西北大学)公开了一种细胞色素C的纯化新工艺，包括以下步骤:(1)从动物脏器或者酵母中提取得到细胞色素C的粗提液；(2)向粗提液中加入无机盐进行盐析，静置离心弃去沉淀的杂蛋白，收集上清液；(3)加缓冲液调节上清液中无机盐浓度至20%～35%，再用前沿疏水色谱法对其进行纯化，即将所得溶液连续上样于预先用20%～35%的无机盐溶液平衡过的疏水色谱柱中，收集穿透液；(4)用20%～35%无机盐溶液冲洗色谱柱至吸光度达到稳定，收集色谱流出液，与穿透液合并，即为纯化后的细胞色素C。本发明操作简便，分离纯化效果好，效率高，成本低。

中国专利申请号200710086421.0(CN101019836A，蔡海德)公开了细胞色素C纳米脂质体药物及其制备方法。其中细胞色素C纳米脂质体药物，包括如下重量份数的原料：中性磷脂40-80；谷甾醇10-20；胆固醇20-40；胞色素C10-30；聚乙二醇20-25；还原性谷胱甘肽5-10；维生素C40-50。据信该发明提供的脂质体药物可用于临床各种缺氧的急救或辅助治疗。