[发明专利]同时检测心型脂肪酸结合蛋白和肌钙蛋白I的快速定量检测装置及检测方法

说明书

技术领域

本发明专利是涉及医学临床诊断技术领域，特别是涉及一种以免疫胶体金快速检测方法制备的同时检测心型脂肪酸结合蛋白和肌钙蛋白I的快速定量检测装置及检测方法。

背景技术

心型脂肪酸结合蛋白(FABP)是心脏中富含的一种新型小胞质蛋白。它具有高度心脏特异性，在心脏以外的组织中只有低浓度表达。心肌缺血性损伤出现后，hFABP可以早在胸痛发作后1-3小时在血液中被发现，6-8小时达到峰值而且血浆水平在24-30小时内恢复正常。心脏脂肪酸结合胞质蛋白由132个氨基酸组成，分子量为15kDa。FABP基因位于染色体I上。它是心脏最丰富的蛋白质之一。FABP的生物学方表现说明其可作为一种对心肌损伤的早期诊断有用的生物标志物。

作为心肌损伤的早期诊断有用的生物标志物，FABP比传统的肌红蛋白(MYO)更好，这两种在心肌和骨骼组织中表达的低分子量胞质蛋白是线粒体氧化的基质而且在症状发作后2小时内释放，6小时出现最大浓度，24小时内恢复基线浓度。然而，他们在心脏和肌肉组织中的浓度不同。FABP浓度比骨骼肌中高2-10倍，与此相反，心脏细胞中肌红蛋白浓度比骨骼细胞中低2倍。肌红蛋白的正常血浆浓度比FABP的高10-15倍。因而FABP较肌红蛋白具有相似的灵敏度和更高的特异性。

肌钙蛋白是由C，T，I三个亚单位组成的复合体，调节肌肉的收缩和舒张。肌钙蛋白I是心肌细胞所特有，是复合物中的抑制亚单位，抑制肌球蛋白与肌钙蛋白连接，有防止肌肉收缩的作用。cTnI分子量为22.5KD，多肽的N端较骨骼肌TnI多26个氨基酸，氨基酸顺序差异达40％，因而抗原性与骨骼肌明显不同。cTnI约3％游离在胞浆内，其余同心肌结构蛋白相结合，当心肌损伤时，游离于胞浆内的cTnI快速释放入血循环，血清cTnI水平3～5小时升高，其后肌原纤维不断崩解破坏，cTnI不断释出，血清水平于24小时达高峰，5～10天后降至正常，cTnI增高预示着心肌组织的改变。随着对cTnI深入研究，无论是对心肌的特异性还是诊断敏感性，传统的肌酸激酶同工酶(CK-MB)的地位都受到了严重挑战.cTn被认为是目前最好的确定标志物，正逐步取代CK-MB成为AMI的诊断“金标准。

目前在急性心梗的快速检测方面，采用CTNI、CKMB、CTNI联测是一种常用的方法，然而，如果用FABP和CTNI来替代3联测，应该具有更好的检测性能，特别是如果采用定量检测，将能更全面的反映心肌损伤的状况。目前尚没有同时检测心型脂肪酸结合蛋白和肌钙蛋白I的快速定量检测装置的报道出现。

发明内容

本发明目的是提供一种同时检测心型脂肪酸结合蛋白和肌钙蛋白I的检测装置及检测方法，用来检测血清、血浆和全血样本中的FABP和CTNI。具有操作简便、反应快速、结果准确、可信、适合现场检测等优点。发明内容如下：

一种同时检测心型脂肪酸结合蛋白和肌钙蛋白I的快速定量检测装置及检测方法，其特征在于装置由相互独立的心型脂肪酸结合蛋白(FABP)和肌钙蛋白I(CTNI)检测试纸、双联卡壳和内置了相应标准曲线和判定方法的免疫层析结果判读记录仪组成。

所述的检测装置，其特征在于FABP检测试剂试纸由含有胶体金标记的抗人FABP抗体的胶体金垫、包被有配对FABP抗体(T线)和抗鼠IgG(C线)的NC膜、样品垫、吸样垫和塑料底板组成。CTNI检测试剂试纸由含有胶体金标记的抗人CTNI抗体的胶体金垫、包被有配对CTNI抗体(T线)和抗鼠IgG(C线)的NC膜、样品垫、吸样垫和塑料底板组成。每个试纸的宽度为3-5mm，长度为7-8cm。样品垫、胶体金垫、NC膜和吸样垫从塑料底板一端依次排列至另一端。

所述的检测装置，其特征在于双联卡壳包含上盖和下盖两个部分，内部可平行放置两条检测试纸。卡壳上盖的下部对应样品垫部分设置了样品孔和稀释液孔，用于加入样本和稀释液，卡壳上盖的中间部分应对试纸NC膜中部设置了视窗口，用于观察NC膜上的C、T线，判定结果。

所述的检测装置，其特征在于所述NC膜是一种由硝酸纤维素构成的多孔结构的膜，孔径为8-12um。稀释液垫为玻璃纤维膜或无纺布，吸样垫为吸水滤纸。

所述的检测装置，其特征在于包被有配对抗体的NC膜制备过程为：以0.01M pH7.4磷酸盐缓冲液(PBS)将配对的FABP或CTNI抗体配制成合适的浓度，在喷膜仪在NC膜上以1.2-1.5ul/cm的参数进行划线，包被T线，同时在NC膜上部包被1-2mg/ml的抗鼠IgG作为C线。干燥，备用。