[发明专利]一种测定娑罗子提取物纯化过程中多指标成分含量的方法

说明书

技术领域

本发明属于中药生产过程的质量检测方法，涉及一种近红外光谱技术快速测定娑罗子提取物大孔树脂纯化过程中多指标成分含量的检测方法。

背景技术

近年来，中药注射剂安全性事件频发，不良反应报告的数量也有所增多。中药注射剂生产过程中工况不稳定以及人为操作差异等原因，常常造成中药注射剂质量不稳定，产品安全性无法得到保证，因此，加强中药注射剂生产过程的质量检测对提高中药注射剂的安全性、保障患者的切身利益具有重大意义。

注射用七叶皂苷钠可用于脑水肿创伤和手术后引起的肿胀的治疗，也用于静脉回流障碍性疾病，其原药材是七叶树科植物天师栗的干燥成熟果实（娑罗子）。娑罗子化学成分复杂，包含皂苷类、黄酮类、香豆素类、有机酸类、甾醇类化合物和其他氨基酸等，主要药效成分是α-七叶皂苷钠和β-七叶皂苷钠。药理研究表明，七叶皂苷钠具有很强的消炎、抗渗出、消除肿胀和增加静脉张力及促进淋巴回流的作用。七叶皂苷钠作为娑罗子的主要药效成分，其含量对最终产品药效有着较大的影响，而大孔树脂纯化工艺是影响七叶皂苷钠含量的关键工艺。另外，由于七叶皂苷钠上带有两个糖基，由于工艺的波动，可能会带来糖苷键断裂和糖的生成，检测大孔树脂纯化过程中糖含量的变化有助于了解产品质量变化。固含量也在一定程度上可以明显反应中药生产过程的质量变化。因此，大孔树脂纯化工艺中多指标成分含量的在线检测对于注射用七叶皂苷钠产品质量稳定性研究十分必要。

目前，传统的测定方法如HPLC，样品处理过程复杂，操作繁琐且分析时间过长，难以实现在线检测。近红外光谱分析技术是一种快速无损的现代分析技术，它综合运用了计算机技术、光谱技术和化学计量学等多个学科的最新研究成果，以其独特的优势在石油化工、农业食品、烟草工业以及医药行业等多个领域得到了日益广泛的应用。与传统分析方法相比，近红外光谱技术具有快速分析、样品处理简单等特点，并且近红外光在光纤中具有良好的传输特性，因此可以用于样品的快速检测，非常适合用于中药生产过程的在线分析和远程监控。“一种近红外光谱测定丹参提取液中鞣质含量的方法”（专利申请号：201010125515.6）通过构建近红外光谱定量校正模型快速计算丹参提取液中鞣质含量，可有效解决丹参提取液中鞣质含量监控问题，保证丹参注射液质量。但是目前还极少有将近红外光谱技术应用于大孔树脂纯化过程的快速检测中，本发明将近红外光谱技术应用于七叶皂苷钠大孔树脂纯化过程在线检测中。文献已报道过采用高效液相色谱法测定注射用七叶皂苷钠中七叶皂苷钠A和B的含量，注射用七叶皂苷钠产品中主要含有七叶皂苷钠A、B、C、D，还含有少量的糖元、苷元、脱酰基的降解产物和其他杂质，本发明利用近红外光谱技术对七叶皂苷钠大孔树脂纯化过程中七叶皂苷钠A、B、C、D以及含糖量和固含量进行同时监测，可以更为全面地评价七叶皂苷钠有效成分含量。此外，高效液相色谱法耗时长，每次分析需要20min，难以达到实时监测的效果，而近红外则可以在1min内获得各个指标成分的含量结果，可以真正做到实时监测生产过程质量变化，因此，可以更加有效地降低批次间的差异性，有助于提高产品的稳定性、安全性和有效性。

另外，大孔树脂洗脱终点是大孔树脂纯化过程的一个关键点，洗脱终点的快速判断可以使大孔树脂纯化过程操作更为合理，对实现大孔树脂在线监测具有重要意义。洗脱过程终点是指有效成分含量相对浓度变化率RRCR趋于设定阈值时的取样点。移动块标准偏差法（MBSD法）是一种常用的终点判断方法，已有文献报道采用MBSD法快速判断中药提取终点，但还未见将其用于大孔树脂洗脱过程终点的快速判断中。MBSD法基本原理为：连续几次采集的光谱信号之间的标准偏差变化率小于一定值时，可认为己经到达提取工艺终点。具体操作步骤：首先确定用于计算标准偏差的连续光谱条数n，即确定移动块窗口宽度，接着计算终点判断开始时测得的n条光谱之间的标准偏差然后计算S_i的平均值其中X_ij为第j条光谱在波数i处的吸光度值，为窗口内n条光谱在波数i处的吸光度值的平均值，m为选取的波数总数。按时间顺序剔除原n条光谱中最早的那条光谱，并加入最后那条光谱的下一条的光谱，重新计算S_i、S。依次重复剔除、加入和计算操作，最后对偏差平均值S作图，并根据S的变化率判断提取终点到达与否。本发明将MBSD法终点判断原理应用于七叶皂苷钠大孔树脂纯化过程，可以实现洗脱终点的快速判断。

发明内容