[发明专利]OC22多肽的完全抗原及其制备方法和抗体

说明书

技术领域

本发明涉及免疫学领域，特别是涉及一种OC22多肽的完全抗原及其制备方法和抗体。

背景技术

骨钙素蛋白质是由成骨细胞分泌的，其含量随着年龄的变化而变化，通过血清骨钙素的含量可以了解成骨细胞的状态，对于骨质疏松的判定等具有重要的意义。

OC22多肽是小鼠骨钙素蛋白质分子中的一段保守序列，经过序列分析此段多肽具有抗原性的多肽。然而，OC22多肽自身的免疫原性较低，无法作为完全抗原投入使用。

发明内容

基于此，有必要提供一种OC22多肽的完全抗原。

此外，还有必要提供该OC22多肽的完全抗原的制备方法，以及与该OC22多肽的完全抗原特异性结合的抗体。

一种OC22多肽的完全抗原，所述OC22多肽的完全抗原由OC22多肽和交联剂活化的匙孔血蓝蛋白偶联形成；

其中，所述OC22多肽的序列为SEQ ID No.1所示的序列，所述OC22多肽通过半胱氨酸与所述交联剂活化的匙孔血蓝蛋白偶联。

在一个实施例中，所述OC22多肽与所述交联剂活化的匙孔血蓝蛋白的摩尔比为800～1000：1。

在一个实施例中，所述交联剂为马来酰亚胺。

一种OC22多肽的完全抗原的制备方法，包括如下步骤：

提供交联剂活化的匙孔血蓝蛋白，并用磷酸钠缓冲液对所述交联剂活化的匙孔血蓝蛋白进行重构，得到重构后的交联剂活化的匙孔血蓝蛋白溶液；

提供OC22多肽，并将所述OC22多肽用偶联缓冲液或双蒸水溶解，得到OC22多肽溶液；

将所述重构后的交联剂活化的匙孔血蓝蛋白溶液和所述OC22多肽溶液混匀后充分反应，分离纯化后得到由所述OC22多肽和所述交联剂活化的匙孔血蓝蛋白偶联形成OC22多肽的完全抗原，其中，所述OC22多肽的序列为SEQ ID No.1所示的序列，所述OC22多肽通过半胱氨酸与所述交联剂活化的匙孔血蓝蛋白偶联。

在一个实施例中，所述交联剂活化的匙孔血蓝蛋白溶液的浓度为5mg/mL；

所述OC22多肽溶液的浓度为8mg/mL。

在一个实施例中，将所述重构后的交联剂活化的匙孔血蓝蛋白溶液和所述OC22多肽溶液混匀的操作中，所述OC22多肽与所述交联剂活化的匙孔血蓝蛋白的摩尔比为800～1000：1。

在一个实施例中，所述交联剂为马来酰亚胺。

在一个实施例中，分离纯化后得到由所述OC22多肽和所述交联剂活化的匙孔血蓝蛋白偶联形成OC22多肽的完全抗原的操作为：

用30mL含有质量百分数为0.01%的叠氮钠PBS缓冲液平衡Sephadex G-25M凝胶柱，接着向所述Sephadex G-25M凝胶柱加入反应液，用总体积10mL的所述PBS缓冲液洗涤，收集洗出液，每次收集0.5mL～1.0mL，在280nm下测量吸光度值，根据吸光度值收集含蛋白洗脱液。

一种OC22多肽的完全抗原的抗体，所述OC22多肽的完全抗原的抗体与上述的OC22多肽的完全抗原特异性结合。

一种OC22多肽的完全抗原的抗体，所述OC22多肽的完全抗原的抗体为上述的OC22多肽的完全抗原作为抗原被免疫系统识别后表达得到的抗体，所述OC22多肽的完全抗原的抗体为多克隆抗体或单克隆抗体。

在一个实施例中，所述OC22多肽的完全抗原的抗体为兔源的多克隆抗体。

这种OC22多肽的完全抗原具有较强的免疫原性，可以作为完全抗原投入使用。这种OC22多肽的完全抗原的抗体可以用于血清或组织中小鼠骨钙素蛋白质的检测。

附图说明

图1为一实施方式的OC22多肽的完全抗原的制备方法的流程图；

图2为交联剂活化的匙孔血蓝蛋白的结构示意图；

图3为半胱氨酸盐酸盐一水物的结构示意图；

图4为5,5'-二硫双(2-硝基苯甲酸)的结构示意图；

图5为ELISA法测定OC22多肽的完全抗原的多克隆抗体的效价得到的结果图。

具体实施方式

为使本发明的上述目的、特征和优点能够更加明显易懂，下面结合附图对本发明的具体实施方式做详细的说明。在下面的描述中阐述了很多具体细节以便于充分理解本发明。但是本发明能够以很多不同于在此描述的其它方式来实施，本领域技术人员可以在不违背本发明内涵的情况下做类似改进，因此本发明不受下面公开的具体实施的限制。