[发明专利]一种褐蘑菇多糖的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及保健食品加工技术领域，特别是涉及一种具有免疫调节活性的褐蘑菇多糖的制备方法。

背景技术

褐蘑菇Agaricus crocopelus peck，其菇盖表皮细胞含有褐色素呈黄褐色，菇盖多生纤维状鳞片，故名褐蘑菇或褐鳞蘑菇，属于担子菌纲﹑伞菌目﹑蘑菇科、蘑菇属。褐蘑菇盖大柄粗、菌肉肥厚，香味浓郁适口，富含多糖、蛋白质、粗纤维、氨基酸以及矿物质等多种营养物质，具有极高的营养保健医疗价值，因此已经成为风靡欧美及世界发达国家或地区的高品位食用菌。

众多研究表明，褐蘑菇具有明显的抗肿瘤、降血脂、降血糖、抗衰老、降血压和提高机体免疫力等保健功能。其中，多糖作为褐蘑菇主要的活性成分，已经成为近年来研究的热点，具有较为广阔的开发前景。

目前，国内外市场上还少见有褐蘑菇多糖提取物及相关产品，文献中对于褐蘑菇多糖的制备方法报道也只限于传统的热水回流（超声、微波）提取、水提醇沉等工艺，多糖得率及纯度都受到很大的限制，不适合现代规模化生产的要求，大大限制了褐蘑菇多糖在保健食品及医药产品中的应用。

因此，研究开发褐蘑菇多糖提取制备方法，形成褐蘑菇多糖产品制备工艺，对于提高褐蘑菇多糖产品附加值，满足市场需求，具有重大的经济效益和社会效益。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术中存在的技术缺陷，提供一种适合规模化生产的高纯度褐蘑菇多糖的制备方法。

为实现本发明的目的所采用的技术方案是：

一种褐蘑菇多糖的制备方法，包括下述步骤：

（1）将褐蘑菇粉进行微波提取;

（2）将上述所得褐蘑菇水提液冷却至室温，得到褐蘑菇粗多糖溶液；

（3）采用大孔吸附树脂对步骤（2）所得褐蘑菇粗多糖溶液进行除杂，之后，调节pH值范围为3.0-10.0，采用阴阳离子交换树脂串联树脂柱脱蛋白处理；

（4）采用超滤技术对除杂、脱蛋白后的褐蘑菇粗多糖进一步纯化；纯化过程中截留的分子量范围为100000-800000D；

（5）将上述褐蘑菇粗多糖超滤液预冻，使物料中的水分完全冻结，之后真空干燥得到褐蘑菇多糖。

所述采用大孔吸附树脂对褐蘑菇粗多糖溶液进行除杂处理的步骤如下：以葡萄糖计，取浓度为1.0-50mg/mL褐蘑菇粗多糖溶液加入到已处理好的装有大孔吸附树脂的吸附柱中，以0.1-3BV/h的流速进行吸附，以3-10倍柱体积水进行洗脱，洗脱流速为0.5-5BV/h，得到去除杂质的洗脱液。

所述采用阴阳离子交换树脂进行脱蛋白处理的步骤如下：取经过大孔吸附树脂处理的去除杂质的洗脱液，浓缩，调整浓度至1.0-50mg/mL，调节pH值3.0-10.0，依次通过已处理好的阴离子交换树脂和阳离子交换数值串联树脂柱，以0.1-3BV/h的流速进行吸附，以3-10倍柱体积水进行洗脱，洗脱流速为0.5-5BV/h，得到脱蛋白的褐蘑菇多糖溶液；其中，阴离子交换树脂与阳离子树脂的质量比为1:0.5-1:10。

步骤（4）所述超滤技术对脱蛋白后的褐蘑菇多糖进一步分级纯化包括下述步骤：取脱蛋白处理所得的褐蘑菇多糖溶液，进行超滤，截留分子量范围为100000-800000D，工作压力为0.2-0.8Mpa，温度为20-50℃，转子的转速为200-800r/min；收集截留浓缩液，并用蒸馏水清洗，合并洗液与浓缩液，干燥，得褐蘑菇多糖。

所述大孔吸附树脂为非极性大孔吸附树脂。

所述阴离子交换树脂为201x7、D201或D301,或近似型号树脂；所述阳离子交换树脂为D113或001x7,或近似型号树脂。

所述性大孔吸附树脂为D101、AB-8或D4020，或近似型号树脂。

步骤（3）中粗多糖溶液在通过大孔树脂柱前，以葡萄糖计，调整浓度至1.0-50mg/mL；步骤（4）中过大孔树脂柱后多糖溶液在脱蛋白处理前，应浓缩，以葡萄糖计，调整浓度至1.0-50mg/mL，pH值应调整至3.0-10.0。

步骤（5）中预冻至-60至-80℃，维持至少4h；真空干燥的温度为-45℃。

步骤（1）中的微波提取时，微波功率为200-800W，料液比为1:10-1:100。

与现有技术相比，本发明的有益效果是：